Jaké jsou kroky v postupu ELISA?

Postup ELISA začíná na klinice, přičemž vzorek krve je odebírán od pacienta.Poté se následuje několik kroků pomocí testovací sady ELISA v laboratoři.Test detekuje přítomnost protilátek nebo antigenů k onemocnění, jako je HIV, v krvi.Mezi kroky patří přidání různých látek a praní a výsledků se obecně měří změnou barvy..Je nejznámější jako diagnostický test pro HIV.Zkušební deska obvykle sestává z 96 malých jamek, do nichž je imobilizován specifický antigen.Pokud je protilátka přítomna ve vzorku séra, bude se vázat na antigen, což umožní detekci prostřednictvím různých kroků postupu ELISA.

Prvním krokem v postupu ELISA je získat vzorek od pacienta.To se provádí zdravotní sestrou za sterilních podmínek.Krev se obvykle odebírá z žíly v paži nebo ruce.Na paži je umístěn turniket, aby se otočil žílou a usnadnil postup a pokožka se vyčistí tam, kde bude jehla vložena.Když jehla vstoupí, může být pociťována malá píchnutí a krev bude shromažďována ve sterilní trubici. Po odevzdání vzorku krve je přenesena do laboratoře, kde zbytek postupu ELISA provede laboratoř laboratořtechnik.Vzorek krve je nejprve přidán do jamek desky ELISA.Pokud je přítomna specifická protilátka, váže se na antigen.Destička se poté promyje pomocí pufru k odstranění nevázaných protilátek.

Poté se přidá druhá protilátka, obvykle původu zvířat, která má enzym, který je k němu připojen, který se váže na komplex protilátky-antigen.Deska je opět promyta, aby se odstranil přebytek.Enzym je barevně reaktivní, když je na konci postupu ELISA přidán substrát.Výsledek dává měření stupně změny barvy.Ve většině desek ELISA je zahrnuta pozitivní a negativní kontrola, aby se minimalizovaly takové falešné výsledky.Při testování na HIV bude obvykle následovat pozitivní výsledek druhý, potvrzující test, často jiného typu, jako je Western blot.