Co je biotinová protilátka?

Na rozdíl od toho, co by si člověk mohl nejprve myslet, biotinová protilátka není látkou, která je zvýšena proti biotinu.Spíše je biotinová protilátka protilátkou, která byla konjugována biotin.Biotin se silně váže na ligand mdash;Avidin Mdash;které lze zase spojit s molekulami detekovatelnými světlem, jako jsou fluorofory.Biotin a avidin tvoří jednu z nejsilnějších biologicky relevantních kovalentních vazeb známých, což je ligand/receptor konjugovaný biotin a avidin, který je obzvláště užitečný ve vědeckých studiích.

Biotin je B-komplexní vitamín mdash;Vitamin B7.Je to taková malá molekula, že více molekul biotinu může být konjugováno s jedinou monoklonální nebo polyklonální protilátkou.Skutečnost, že biotin je také rozpustný ve vodě, umožňuje větší všestrannost v pufrových systémech, než kdyby byla nerozpustná.Pro větší specificitu se konjugace monoklonální protilátky s biotinem často doporučuje během konjugace polyklonální protilátky.Molekula biotinu může být přímo spojena s protilátkou k zájmu, nebo může být spojena přes molekulární ocas, aby se umožnila větší svobodu pohybu.Může být levně vyrobeno a snadno izolováno.Více avidinových molekul se váže na každý biotinový receptor a zesiluje jediný detekční signál protilátky.Když biotinová protilátka dodržuje antigen zájmu, může experimentátor vystavit komplex avidinu konjugovaným s fluorofory, což činí komplex detekovatelný.Prostřednictvím fluorescenčního zobrazování lze biotinovou protilátku a ligand konjugovaný avidin detekovat světelnou mikroskopií a antigeny zájmu lze studovat

in situ

Ačkoli tvorba a použití biotinové protilátky a fluorescenčně označené molekuly avidin je a avidin molekula jeBěžné řešení pro detekci antigenu existují alternativy, které stále využívají komplex biotin/avidinu.Vazebná biotin na ligand, jako je neurotoxin, může být výhodná při detekci umístění neuronálních receptorů ovlivněných dotyčným neurotoxinem.Je také možné spojovat biotin na nukleotidovou sekvenci, jako je messengerová kyselina ribonukleová (mRNA), aby zjistila, kde jsou tyto nukleotidové sekvence přeloženy do proteinů nebo detekují regulaci buněčné mRNA.Ačkoli produkce biotinylované protilátky je v rámci schopnosti mnoha experimentátorů.Protokoly lze nalézt online naznačující biotinylační metody protilátek, ačkoli nejsnadněji sledovaly protokoly přímo spojovat biotin na protilátku, spíše než navrhovat, jak interkalovat molekulární spacer.Molekulární spacery mezi biotinem a jeho přidruženou protilátkou umožňují většímu rozestupování vystavit více molekul vazebným místům a tyto biotinové protilátky se obvykle zakoupí spíše než vytvářejí.