Skip to main content

Co je diferenciální barvení?

Ačkoli mikroby nebo živočišné buňky mohou být pod mikroskopem viditelné, jednotlivé části malé buňky mohou být obtížné rozlišit, protože barvy pod mikroskopem se mohou zdát podobné nebo se objeví průhledná buňka.Laboratorní analytici, kteří se specializují na mikroskopickou analýzu buněk, používají metody barvení k předávání barev buňce, aby mohli díly jasně vidět.Diferenciální barvení se týká typu barvení, které umožňuje analytikovi rozeznat různé typy buněk;Je to obecný termín, který zahrnuje řadu postupů barvení.

Když je zvíře rozděleno do jeho buněk, buňky se mohou lišit ve vzhledu a funkci.Běžně odlišné druhy mají sady buněk, které se objevují individuální pod mikroskopem.Společným příkladem různých druhů a skupin je způsob, jakým lze většinu bakterií rozdělit do dvou skupin na základě jejich reakce na konkrétní druh skvrny zvané gram skvrny.Hans Christian Gram byl dánský mikrobiolog, který poprvé vynalezl skvrnu v roce 1844, který je stále běžným používáním jako užitečný první krok bakteriální identifikace v laboratorním prostředí.

Při diferenciálním zbarvení je vzorek bakteriální populace ošetřen sadami barviv v procesu, který zahrnuje kroky, jako je zahřívání a promytí vzorků, takže barvivo se dostane do všech buněk.Různé kroky používají barviva jako Crystal Violet a Fuchsin, spolu s dalšími látkami, jako je alkohol a jód, které pomáhají opravit barvu.Buňky, které se zdají růžové, jsou identifikovány jako gram negativní, zatímco modré barvy na konci procesu jsou gram pozitivní.Tento barevný rozdíl pomáhá mikrobiologovi určit, jaký typ buněčné stěny má druh, což pomáhá zúžit možný seznam druhů, do kterého patří neznámý vzorek.Kromě označení typu gramu je proces diferenciálního barvení zřejmým tvarům a uspořádáním buněk, což také pomáhá při identifikaci.

Zvířecí buňky lze také třídit pod mikroskopem s diferenciálním barvením.Například buňky, které cirkulují v krvi, reagují na určité skvrny odlišně.Příkladem je skvrna Wrights, která zahrnuje barviva jako eosin a methylenová modrá a která může sdělit laboratornímu analytikovi, které typy krevních buněk jsou přítomny ve vzorku a v jaké koncentraci.Například eosinofilní buňka má tendenci zabírat mnoho eosinových zbarvení ve srovnání s jinými krevními buňkami.Analytici obecně používají zbarvení skvrn identifikované diferenciálním barvením spolu s dalšími buněčnými charakteristikami, jako je velikost, tvar a vnitřní struktury, aby zjistili, které buňky jsou ve vzorku.