Co je to konfokální mikroskop?

Konfokální mikroskop je zvláštní druh fluorescenčního mikroskopu používaného k získání vysoce kvalitních 2D a 3D obrázků.Se základním (širokým) fluorescenčním mikroskopem, světlo konkrétní vlnové délky, je svítí na vzorku a vzorek absorbuje část tohoto světla a zbytek odráží při delší vlnové délce.Delší světlo vlnové délky prochází dichroickým zrcadlem, které umožňuje projít delší světlo vlnové délky, ale ne původní (kratší) světlo vlnové délky.Osoba sledující vzorek vidí pouze světlo, které prošlo dichroickým zrcadlem.Základní fluorescenční mikroskopy zachycují jak zaostřené, tak i mimo zaostřovací světlo, které funguje dobře pro velké vzorky, kde není vyžadováno velmi vysoké rozlišení.Pro prohlížení jemných detailů nefunguje tak dobře.K zachycení fluorescenčních obrazů s vysokým rozlišením je zapotřebí konfokální mikroskop.

Konfokální mikroskop používá dírku k odmítnutí zaostření.Místo toho, aby světlo procházelo pouze dichroickým zrcadlem, se světlo prochází jak dichroickým zrcadlem, tak dírkou, což znamená, že osoba sledující vzorek vidí pouze jeden bod vzorku.Aby bylo možné zobrazit celý vzorek, pohyblivé zrcadlo skenování světlo přes obdélníkovou rovinu vzorku a počítač shromažďuje emitované světlo, když se vzorek naskenuje.Úplné skenování povede k optickému řezu nebo průřezu vzorku.Tento typ mikroskopie se nazývá konfokální laserová skenovací mikroskopie, částečně proto, že jako zdroj světla se používá laser.Vytvořte trojrozměrný obraz.Mikroskop může být naprogramován tak, aby měnil prostor mezi řezy, v závislosti na tom, jak svěží 3D obrázek, který chce uživatel získat.Mikroskop může také měnit rychlost, při které skenuje obraz, přičemž pomalý skenování dává vyšší rozlišení než rychlé skenování.Jsou drahé a poněkud velké a často mají pokoje věnované jejich použití, protože místnost musí být tma, aby se získala dobrý zářivka.Ačkoli konfokální mikroskopy se nejčastěji používají k prohlížení buněk a struktur v buňkách, lze je použít k získání obrazu jakéhokoli trojrozměrného fluorescenčního vzorku a někdy se používají k prohlížení polovodičových materiálů.