Skip to main content

Co je exprese rekombinantního proteinu?

Exprese rekombinantního proteinu je výroba proteinu odvozeného z rekombinantní DNA.Jedná se o běžnou techniku v molekulární biologii a ve farmaceutické produkci hormonálních náhrad.Rekombinantní DNA je specifická část genu určeného k exprimu jediného produktu v hostitelské buňce, vedená speciálními chemickými faktory, takže pravý protein je exprimován ve velkém množství.Mnoho hormonů a enzymů, které byly historicky odvozeny ze zdrojů zvířat, je nyní syntetizováno expresí rekombinantního proteinu, poté sklizeno a rafinováno z hostitelských buněk.

Abychom exprimovali rekombinantní proteiny, musí být do hostitelského genomu zavedeny pečlivě vybrané sekvence DNA.Vezmeme -li části genetického kódu z jednoho organismu a umístění do buněčných jádra jiného je forma klonování.To se provádí vložením sekvence rekombinantní DNA, která kóduje požadovaný protein do jádra, což iniciuje expresi genu přepisováním do RNA.Rekombinantní proteiny jsou sestaveny, když kusy mRNA nesou informací z DNA migrují do ribozomů z buněk a zahajují produkci proteinu podle specifické šablony.

Hostitelské buňky budou vytvořit nedostatečná množství rekombinantního proteinu, pokud nebude DNA zavedena s příslušnými vektory, takže správné genetické informace budou vyjádřeny v dostatečném množství.Faktory exprese proteinu jsou molekulární signály, které musí doprovázet rekombinantní DNA, když je vložena do hostitelských buněk, aby se zajistilo, že cílový protein bude nadměrně exprimován.Toto je jediný způsob, jak exprese rekombinantního proteinu může vytvořit dostatečnou látku pro farmaceutické nebo laboratorní použití.

Sestava ribozomálního proteinu nedokončí proces exprese proteinu, protože během sklizně obsahu bakteriálních nebo kvasinkových buněk se mísí s konečným produktem.Exprimované rekombinantní proteiny musí být purifikovány separací od kusů zničených buněčných částí.Někdy molekulární značka označí protein, takže se může vázat na kovovou nebo jinou látku a být izolována z odpadu.Existují různé techniky v závislosti na faktorech, jako je velikost proteinu a složitost hostitelské buňky.

Exprese lidského rekombinantního proteinu má rozsáhlé komerční a lékařské aplikace.Mnoho hormonů, protilátek a enzymů bylo dříve extrahováno ze zvířecí nebo mrtvoly, ale nyní se vyrábí synteticky pomocí rekombinantní DNA technologie.Dva zvláště důležité příklady jsou lidský růstový hormon a inzulín.Mnoho hormonálních náhradních terapií se spoléhá na syntetické proteiny, stejně jako různé testy používané molekulárními a buněčnými biology ve svých laboratořích.V mnoha případech se bakterie používají jako hostitelské buňky pro jednoduché produkty, zatímco složitější exprese rekombinantního proteinu, zejména genů ze zvířat, může být prováděna v houbách a kvasinkách.