Co je Western blot?

Western blot je technika laboratorní analýzy, která se používá k izolaci proteinů.Může být použit při diagnostice určitých onemocnění a také ve výzkumu různých proteinů a procesů.Skvěle je Western blot spojen s diagnózou infekce HIV, ale lze jej také použít k hledání stop hovězí spongiformní encefalitidy (BSE) a lymské onemocnění.Vzorky zaslané pro testování s protokolem Western blot mohou vrátit výsledky za několik dní až několik týdnů, v závislosti na laboratorní kapacitě a naléhavosti.Proveďte elektroforézu tak, aby se proteiny oddělily o délku.Pás elektroforézního gelu s izolovanými proteiny cílové délky lze použít k přenosu proteinů na substrát nitrocelulózy pro další fázi testu.Během této fáze je do vzorku zavedena protilátka, s cílem označit proteiny antigeny, na které se tato protilátka zamkne.

Jakmile jsou proteiny označeny, lze je snadno identifikovat.V případě testování na onemocnění ukazuje přítomnost reaktivního proteinu, že vzorek testoval pozitivní.Západní bloty zřídka vracejí falešné pozitivy, i když se to může stát příležitostně, a mohou také vrátit falešné negativy, ve kterých má osoba skutečně nemoc, ale neukazuje to při testování Western blot.To může být zvláště běžné v případech, kdy se činidlo způsobující onemocnění dosud nezačal replikovat.

Vědci mohou použít výsledky k identifikaci specifických proteinů, které sledují, a pro řadu dalších účelů.Pochopení toho, jak funguje protokol Western blot protokol, je pro některé vědce a laboratorní techniky důležitou dovedností, protože pomocí této metody musí být schopny vrátit spolehlivé a spolehlivé výsledky.Laboratorní dovednosti včetně učení, jak zvládnout komplikované nebo špatné vzorky a jak se vyhnout kontaminaci během procesu, aby bylo známo, že výsledky testu jsou pravdivé.

Tato technika je někdy známá jako imunoblot, protože v podstatě požadované proteiny jsou v podstatě požadované proteiny„Blotted“ s protilátkami, aby se ukázaly.Tento test lze použít k hledání proteinů u všech zvířat, nejen lidí, přičemž veterináři často používají test Western blot k určení, zda bylo stádo krav infikováno nebo vystaveno BSE.