Hvad er et genbibliotek?

Et genbibliotek er udtrykket for opsamlinger af deoxyribonukleinsyre (DNA) fragmenter, der er blevet klonet tilfældigt fra genomerne af organismer.De klones som plasmider, der kan replikeres separat fra deres kromosomer og fager, som er en parasitisk virus, der lever af bakterier.Når klonet som plasmider er samlingen af værtsceller, og hver af cellerne indeholder et DNA -fragment.Faggenbiblioteker består af, hvad der kaldes faglysater, som er rester af ødelagte celler med et DNA -fragment indsat.Når genbiblioteker indeholder en samling af al den genetiske information om en organisme, betragtes de som et repræsentativt genbibliotek.

Derudover kan biblioteker bruge cellulær rekombinant nukleinsyre (RNA) til plademateriale, og denne samling af værtsceller medDe rekombinante vektorer er kendt som et CRNA -genbibliotek.Genbiblioteksscreening finder bestemte celler, der indeholder kloningsvektorer med et bestemt gen, der søges i et genbibliotek og bruger derefter en af mange teknikker til at isolere og høste dem.Når de er høstet, betragtes cellerne som klonet.For at have en rimelig chance for at isolere og klone et bestemt gen bruges normalt kun repræsentative genbiblioteker som hvert gen og hvert originalt DNA -fragment af et bestemt genom opsamles deri.For at nå en 99% chance for at lokalisere et bestemt humant gen til kloning ville mere end 600.000 klonede celler screenes for at finde det ønskede gen fra et repræsentativt genbibliotek.

DNA ekstraheres fra en organisme for at starte et genbibliotek.Biblioteket er struktureret til at organisere DNA og dets tusinder af forskellige gener.Biblioteket bliver en samling af titusinder af bakteriekolonier, der hver er moduleret med et fragment af DNA fra organismen, der indeholder et gen af særlig interesse.Biblioteker indeholder også restriktionsenzymer og et plasmid.Restriktionsenzymerne bruges til at læse nukleotidinformationen af DNA'et og bruges til at skære DNA'et i fragmenter ved at adskille nukleotiderne fra hinanden.

De samme begrænsningsenzymer skærer bakterielle plasmider og fragmenterne og plasmiderne kombineres i et reagensglas for at kombinere, hvilket gør en ny kombination.Disse rekombinante plasmider returneres derefter tilbage til bakteriekultur ved hjælp af enten varmechok eller elektroporering.Disse trin udføres igen og igen, indtil der er dannet et helt genbibliotek for en bestemt genomorganisme fra alle fragmenterne i den originale DNA -ekstraktion.