Hvad er en transfektionsreagens?

Et transfektionsreagens er en bærer for DNA, som en forsker kan bruge til at indsætte DNA'et i celler i kultur.En række typer reagenser er tilgængelige gennem livsvidenskabelige virksomheder, og forskere kan også udvikle deres egne til brugerdefinerede applikationer.Disse molekyler kan arbejde på en række forskellige måder at transportere DNA ind i målcellerne og indsætte det i deres genom.Den typiske proces involverer at blande det ønskede DNA med reagenset, tilføje det til celler i kultur, inkubere dem og derefter screene dem for at se, der indeholder det nye DNA.

DNA -transfektion er et meget vigtigt forskningsværktøj.Forskere kan indsætte genetisk materiale for at tænde gener eller tavse dem og kan bruge transfektion til at tvinge celler i kultur til at udføre på en bestemt måde.Målet kan være kortvarig genetisk ekspression med henblik på undersøgelse.Det kan også være en permanent ændring, der giver forskeren mulighed for at skabe en koloni af klonede celler, der alle udtrykker det samme gen.Disse celler kan bruges i forskning og kan have terapeutiske anvendelser.

Calciumphosphat er en af de ældste transfektionsreagenser.Forskere bruger også lipidbaserede materialer, som har tendens til at være meget effektive.De kan også bruge virale DNA -vektorer såvel som mekaniske metoder som mikroinjektion, hvor det ønskede DNA injiceres direkte for at reducere risikoen for at nedbryde materialet.Genpistoler er et andet populært værktøj til DNA -transfektion.

Når en forsker vælger et transfektionsreagens, er der en række overvejelser.Disse inkluderer, hvordan reagenset vil blive brugt, hvilken slags DNA der er involveret, og hvilken slags effekter forskeren ønsker.Transfektionsreagenset er ikke altid perfekt pålideligt, og forskeren har også brug for et godt screeningsværktøj til at finde og isolere de succesrige transficerede celler.Dette vil give forskerne mulighed for at kassere celler, der ikke accepterede det nye genetiske materiale sammen med celler, der gjorde, men udtrykke det på en usædvanlig måde, der antyder, at en vis nedbrydning af DNA kan have fundet sted.

DNA -transfektionsreagenslister er tilgængelige fra livsvidenskabvirksomheder.De fleste har et diagram for at hjælpe forskere med at beslutte, hvilken de de skal bruge, på grundlag af celletype og hvilken slags genetisk materiale forskeren ønsker at indsætte.Forskere kan normalt anmode om prøver for at give dem mulighed for at teste et reagens, før de forpligter sig til dets anvendelse i forskning.Det er vigtigt at læse dokumentationen omhyggeligt for at sikre, at driften af transfektionsreagenset forstås fuldt ud før brug.