Hvad er et ELISA -assay?

Et ELISA -assay er en testproces, der registrerer stoffer for at identificere visse sygdomme, allergier og ulovlige stoffer i kroppen.Det er også kendt for at blive brugt til at detektere human immundefektvirus (HIV).Nogle af de stoffer, det kan detektere, er antistoffer, hormoner og proteiner.Hovedprincippet bag ELISA -assayet er, at en kemisk reaktion mellem en patients flydende prøve og en specifik laboratorieprøve indikerer tilstedeværelsen af et bestemt stof, der er forbundet med en specifik sygdom eller medicinsk tilstand.Elisa, som et forkortelse, står for "enzymbundet immunosorbentassay."

Opfindelsen og udviklingen af ELISA-assayet skete, fordi der var behov for en mere sikker testmetode end Radioimmunoassay, der bruger radioaktivitet til at producere et kemikaliereaktion.I 1960'erne ledte to separate grupper af forskere af Stratis Avrameas og G.B.Pierce fik succes med at samarbejde med visse antistoffer med visse enzymer og producere en kemisk reaktion fra kombinationen.Med denne viden til rådighed opfandt to forskere fra Stockholm University, Peter Perlmann og Eva Engvall, ELISA -metoden, hvor de offentliggjorde deres eksperimenter og systemet bag assayet i 1971. Siden da er ELISA -assayet blevet brugt over hele verden, selvom radioimmunoassay erStadig tilgængelig på grund af dets mindre omkostninger.

Der er to almindelige typer ELISA -assay: den direkte og den indirekte metode, hvor sidstnævnte er mere almindeligt anvendt.Det første trin ville være at udtrække en prøve fra patienten, normalt blod eller urin, som begge kan gennemgå en adskillelsesproces for at udtrække det klare serum, der indeholder antistofferne.Et ELISA-kit indeholder ofte en plade, der indeholder 96 mini-container kaldet "brønde", som vil blive belagt med et antigen, der muligvis kan have en reaktion på et nuværende antistof.Et antigen betragtes ofte som et fremmed stof, som kroppen angriber ved at producere specifikke antistoffer, så hvis en patient har erhvervet et antigen fra en bestemt sygdom, skal hans serum indeholde antistoffer, der svarer til det nævnte antigen.

Patientens serum vil derefter værehældes i brøndene og inkuberet derefter for at lade antistofferne klæbe til proteinbelægningen.Efter inkubationsperioden skylles brøndene af for at fjerne resten af serumet og andre antistoffer, der ikke har bundet til belægningen.Et andet sæt antistoffer, der er ekstraheret fra dyr, normalt rotter, vil blive hældt i brøndene for at påvise de humane antistoffer, og en anden inkubationsperiode finder sted, og dyreantistofferne vil blive vasket af igen.Et enzymsubstrat tilsættes derefter, så reaktionen kan ses synligt i farver.Typisk vil en stærk farveskygge indikere et positivt resultat, hvilket betyder, at patienten har sygdommen eller andre medicinske tilstande testet for.