Skip to main content

Hvad er antistofdetektion?

Antistofdetektion er vigtigt i medicinen for at påvise sygdomme, da antistoffer er store proteiner, der kan påvise vira og bakterier.Antistofdetektion udføres i laboratorier og i marken for at undersøge antistof og antigenbindinger og identificere et antistof ved dets særlige farveændring, når et enzym reagerer underlagsmolekyle er forbundet til det, mens det stadig er bundet til antigenet.Detektionstesten er kendt som enzymbundet immunosorbentassay (ELISA).Før udviklingen af ELISA var de eneste assays radioimmunoassays, der identificerede antistoffer ved deres specifikke radioaktivitet i 1960'erne.I de tidlige 1970'ere blev udviklingen af flere ELISA -teknikker til at identificere specifikke antistoffer.

Den indirekte sandwich ELISA -teknik til antistofdetektion forbereder en bufret opløsning indeholdende et sygdomsantigen og binder det til en plastplade.Derefter introduceres et primært antistof fra en patient for at binde med antigenet.Dernæst indføres et sekundært antistof med et fastgjort enzym, og et substrat til enzymet tilsættes.Dette medfører en reaktion, der ændrer enzymets farve, hvilket signalerer de to antistoffer har bundet, hvis antistoffet fra patienten er positivt for dette sygdomsantigen.Styrken af farveændring angiver mængden af sygdom, som antistoffet har påvist;Denne styrke af farve måles derefter kvantitativt med et spektrometer.

En anden ELISA -teknik, der er god, når prøver fra patienter er rå eller uren, er den konkurrencedygtige ELISA, når et umærket antistof inkuberes med patientantigenprøven.Det bundne antistof/antigenkompleks vaskes, så det ubundne antistof fjernes og et sekundært antistof kombineret med et enzym, der er specifikt for det primære antistof, indføres for at binde med antigenet.Med tilsætning af et substrat til enzymet, hvis sygdommen detekteres af antistoffet, vil enzymet producere kromogene eller fluorescerende egenskaber som et signal.En felttest, der bruges af israelske læger, bruger et reagensglas fuld af proteinfragmenter og antistoffer og introduktionen af en blå væske.Hvis den blå væske vender sig til rødt inden for ti minutter, genkendes det særlige antigen i reagensglaset af antistoffet for den bestemte sygdom.

I hårde at nå ud til udviklingslande er laboratorier ikke let tilgængelige.Mange kommercielle antistofdetektionssæt er solgt til sundhedspersonale til at teste for tuberkulose, især pædiatrisk og human immundefektvirus/autoimmunmangel syndrom (HIV/AIDS) relateret tuberkulose.En undersøgelse, der omfattede 68 specifikke undersøgelser, fandt, at disse sæt ikke var så pålidelige som sputum -udstrygningsmikroskopi.

Malaria er en anden sygdom, for hvilken antistofdetektion bruger en fluorescerende antistoftestprocedure.Denne procedure er god til screening af bloddonorer, da transfusionsinduceret malaria muligvis ikke viser på en simpel blodfilmundersøgelse.Hvis en patient viser gentagne blod -negative prøver, men alligevel udviser stærk symptomologi af sygdommen, kan den fluorescerende markørtest afsløre den.Når de undersøges under et mikroskop, viser antistofferne for malaria ofte en æble-grøn farve, der er positiv for malariaparasitten.