Wie funktioniert bakterielle Endotoxin -Tests?

Bakterielle Endotoxin -Tests beinhalten typischerweise die Verwendung von Reagenzien, die, wenn sie in einer Lösung mit einem möglichen Verunreinigungen gemischt werden, eine Reaktion verursachen und das Vorhandensein eines Endotoxins bedeuten.Chromogene Tests, der Gel -Gerinnselentest und die turbidimetrischen Tests sind die Methoden, die Wissenschaftler üblicherweise für bakterielle Endotoxin -Tests anwenden.Techniker verwenden diese Bewertungsmethoden für eine Vielzahl von Substanzen und Objekten, wenn sie auf Endotoxinverschmutzung prüfen.Wasser, die Rohstoffe, die für die Herstellung von Medikamenten, Geräten und Verpackungen verwendet werden, müssen alle Endotoxinstandards bestehen.

Bakterien, Pilze und Viren haben alle schützende Außenmembranen, die aus Lipopolysacchariden bestehen, die auch als LPS bezeichnet werden.Der Lipidanteil dieser Ketten enthält Endotoxine.Diese Substanzen bleiben im Allgemeinen innerhalb der Membran, werden jedoch während des Prozesses der Zellteilung und während der zellulären Zerstörung oder Lyse freigesetzt.Beim Menschen verursachen diese Substanzen Fieber, abnormale Gerinnung, septische Schock und andere Symptome, obwohl Endotoxine im Gegensatz zu Exotoxinen in der Zelle nicht in ein Toxoid umwandeln.Im Allgemeinen prüfen Mikrobiologen auf das Vorhandensein von Endotoxinen, die mit verschiedenen gramnegativen Bakterien assoziiert sind, einschließlich e.coli .

Der Gel-Gerinnselentest oder Limulus amoboecyte Lysat (LAL) -Assay umfasst die Verwendung einer von den Amobozyten der Hufeisenkrabbe abgeleiteten Membran-Zerstörer-Chemikalie, die auch als limulus polyphemus bezeichnet wird.oder Schilling tritt auf, wenn das Lysat dem betreffenden Objekt oder der betreffenden Substanz ausgesetzt ist.Mikrobiologen verwenden typischerweise diese Methode des bakteriellen Endotoxin -Tests in Verbindung mit chromogenen und turbidimetrischen Tests für schlüssige Ergebnisse.Wenn dieses Lysat ein Endotoxin kontaktiert, erzeugt die Reaktion eine bestimmte Farbe.Der endgültige Testprozess umfasst die Messung der Trübung oder Trübung der Lösung.Techniker setzen die im Gel -Gerinnseltest gebildete Lösung einem Spektrophotometer aus, das einen Lichtstrahl abgibt.Durch Messen des Verlusts der Lichtintensität im Strahl, während er die Lösung durchläuft, können Mikrobiologen bestimmen, ob ein Endotoxin vorhanden ist oder nicht.

Labor -Associates absolvieren diese drei bakteriellen Endotoxin -Tests im Allgemeinen zwei- oder dreimal, um genaue Ergebnisse zu gewährleisten.Der Gel -Test wird nicht ausschließlich verwendet, da seine niedrigste Nachweisgrenze 0,03 Ehrlich -Einheiten pro Milliliter (EU/ml) beträgt.Chromogene und turbidimetrische Tests erkennen Endotoxine im Bereich von 0,005 EU/ml.Sicherheitsparameter unterscheiden sich stark von der getesteten Substanz.Während steriles Wasser, das für Injektions- oder Bewässerungszwecke verwendet wird, nicht mehr als 0,25 EU/ml enthalten kann, können steriles Wasser für Inhalationszwecke bis zu 0,5 EU/ml enthalten.