Was ist ELISA -Protokoll?

Ein enzymgebundener Immunosorbent-Assay (ELISA) ist ein häufiger Test in der Immunologie zum Nachweis von Antigenen oder Antikörpern.Antigene provozieren eine Reaktion des Immunsystems mdash;Mit anderen Worten, sie verursachen Krankheiten.ELISA wird verwendet, um viele bakterielle und virale Antigene nachzuweisen, einschließlich des menschlichen Immundefizienzvirus (HIV), Malaria, Cholera, Masern und Mumps.Ein leicht unterschiedliches ELISA -Protokoll kann verwendet werden, um Antikörper gegen diese und viele andere Krankheitserreger nachzuweisen.Ein ELISA-Protokoll ist das Schritt-für-Schritt-Verfahren für die Durchführung einer bestimmten ELISA.ELISA hängt von enzymgebundenen Antikörpern ab, auch

Antiglobuline

genannt.Ein an diesen Antiglobulinen angebrachten Signalmolekül führt dazu, dass ein Substrat während des Assays zugesetzt wird, um die Farbe zu ändern, falls das gewünschte Antigen oder Antikörper vorhanden ist.Die Menge an vorhandenem Antigen oder Antikörper ist proportional zur Menge der Farbänderung, die mit einem elektronischen Plattenleser gemessen werden kann. Es gibt drei Haupttypen von ELISA.Eine

Direct

ELISA wird normalerweise verwendet, um Antigene als Antikörper nachzuweisen.Dies ist das einfachste ELISA-Protokoll, da der enzymgebundene Antikörper direkt an das gewünschte Antigen bindet.Substrat wird dann hinzugefügt, um die Menge der vorhandenen Antigens zu bestimmen.genannt Sandwich Elisa mdash;kann verwendet werden, um Antigene zu erkennen.Ein Sandwich -ELISA -Protokoll benötigt zwei Antikörper, die als Einfang- und Nachweisantikörper bezeichnet werden, um an das gewünschte Antigen zu binden.Ein Antiglobulin wird zugegeben, das an den Nachweisantikörper bindet und das Substrat zugesetzt wird.Die indirekte ELISA folgt einem ähnlichen Protokoll, verwendet jedoch ein Capture -Antigen anstelle eines Capture -Antikörpers, um den gewünschten Antikörper nachzuweisen.Sensitiver Assay.Im Gegensatz zu den anderen ELISA-Protokollen verwendet wettbewerbsfähige ELISA ein enzymgebundenes Antigen anstelle eines Antikörpers und eine etwas unterschiedliche Quantifizierungsmethode.Darin wird die Probe, die das zu nachgewiesene Antigen enthält, und das enzymgebundene Antigen zu einem Antikörper zugesetzt und die beiden Antigene um Antikörperbindungsstellen konkurrieren.Wenn das Substrat zugesetzt wird, ist die Farbänderung größer, wobei ein höheres Verhältnis von gebundenen enzymgebundenen Antigenen zu gebundenen Probenantigenen.Dies bedeutet, dass eine höhere Farbänderung bei niedrigeren Konzentrationen des Probenantigens nachgewiesen wird, was diese Methode so empfindlich macht.