Was ist eine Genbibliothek?

Eine Genbibliothek ist der Begriff für Sammlungen von Desoxyribonukleinsäure -Fragmenten (DNA), die zufällig aus den Genomen von Organismen kloniert wurden.Sie werden als Plasmide kloniert, die getrennt von ihren Chromosomen und Phagen replizieren können, die ein parasitäres Virus sind, das sich von Bakterien ernährt.Wenn sie als Plasmide kloniert werden, besteht die Sammlung aus Wirtszellen und jede der Zellen enthält ein DNA -Fragment.Phagen -Genbibliotheken bestehen aus sogenannten Phagen -Lysaten, bei denen es sich um Reste zerstörter Zellen mit einem DNA -Fragment handelt.Wenn Genbibliotheken eine Sammlung aller genetischen Informationen über einen Organismus enthalten, gelten sie als Repräsentationsgenbibliothek.

Zusätzlich können Bibliotheken zelluläre rekombinante Nukleinsäure (RNA) für Liegematerial und diese Sammlung von Wirtszellen mit verwendenDie rekombinanten Vektoren sind als CRNA -Genbibliothek bekannt.Das Gen -Bibliotheks -Screening findet bestimmte Zellen, die Klonierungsvektoren enthalten, wobei ein bestimmtes Gen in einer Genbibliothek gesucht wird, und verwendet dann eine von vielen Techniken zur Isolierung und Ernte.Nach der Ernte werden die Zellen als kloniert angesehen.Um eine vernünftige Chance zu haben, ein bestimmtes Gen zu isolieren und zu klonieren, werden normalerweise nur Repräsentationsgenbibliotheken verwendet, wenn jedes Gen und jedes ursprüngliche DNA -Fragment eines bestimmten Genoms darin gesammelt wird.Um eine 99% ige Chance zu erreichen, ein bestimmtes menschliches Gen für das Klonieren zu lokalisieren.Die Bibliothek ist strukturiert, um die DNA und ihre Tausenden verschiedener Gene zu organisieren.Die Bibliothek wird zu einer Sammlung von Zehntausenden von Bakterienkolonien, die jeweils mit einem DNA -Fragment aus dem Organismus moduliert werden, das ein Gen von besonderem Interesse enthält.Bibliotheken enthalten auch Restriktionsenzyme und ein Plasmid.Die Restriktionsenzyme werden verwendet, um die Nucleotidinformationen der DNA zu lesen, und werden verwendet, um die DNA durch Trennen der Nukleotide voneinander in Fragmente zu schneiden.

Die gleichen Restriktionsenzyme schneiden die bakteriellen Plasmide und die Fragmente und Plasmide werden in ein Reagenzglas kombiniert, um eine neue Kombination zu erzeugen.Diese rekombinanten Plasmide werden dann unter Verwendung des Hitzeschocks oder der Elektroporation wieder in die Bakterienkultur zurückgegeben.Diese Schritte werden immer wieder durchgeführt, bis eine ganze Genbibliothek für einen bestimmten Genomorganismus aus allen Fragmenten der ursprünglichen DNA -Extraktion gebildet wurde.