Comment fonctionne le test bactérien de l'endotoxine?

Le test d'endotoxine bactérienne implique généralement l'utilisation de réactifs qui, lorsqu'ils sont mélangés dans une solution avec un éventuel contaminant, provoquent une réaction, ce qui signifie la présence d'une endotoxine.Les tests chromogènes, le test de caillot de gel et les tests turbidimétriques sont les méthodes que les scientifiques utilisent couramment pour les tests bactériens de l'endotoxine.Les techniciens utilisent ces méthodes d'évaluation sur une variété de substances et d'objets lors de la vérification de la contamination par l'endotoxine.L'eau, les matières premières utilisées pour fabriquer des médicaments, des équipements et des emballages doivent tous passer les normes d'endotoxines.

Les bactéries, les champignons et les virus ont tous des membranes extérieures protectrices constituées de lipopolysaccharides, également appelés LPS.La partie lipidique de ces chaînes contient des endotoxines.Ces substances restent généralement dans la membrane mais sont libérées pendant le processus de division cellulaire et pendant la destruction ou la lyse cellulaire.Chez l'homme, ces substances provoquent de la fièvre, de la coagulation anormale, du choc septique et d'autres symptômes bien que contrairement aux exotoxines dans la cellule, les endotoxines ne se convertissent pas en toxoïde.Généralement, les microbiologistes vérifient la présence d'endotoxines associées à diverses bactéries à Gram négatif, y compris e.coli .

Le test du caillot de gel, ou test de lysat de lyboecyte (LAL) Limulus, implique l'utilisation d'un produit chimique destructeur de membrane dérivé des amibocytes du crabe en fer à cheval, également appelé limulus polyphème.ou le gélification se produit lorsque le lysat est exposé à l'objet ou à la substance en question.Les microbiologistes utilisent généralement cette méthode de test d'endotoxine bactérienne en conjonction avec des tests chromogènes et turbidimétriques pour les résultats concluants.

Le test chromogène de l'endotoxine bactérienne utilise un LAL spécialement traité.Lorsque ce lysat entre en contact avec une endotoxine, la réaction produit une couleur spécifique.Le processus de test final comprend la mesure de la turbidité ou de la nébulosité de la solution.Les techniciens exposent la solution formée dans le test de caillot de gel à un spectrophotomètre, qui émet un faisceau de lumière.En mesurant la perte d'intensité de lumière dans le faisceau lorsqu'il passe par la solution, les microbiologistes peuvent déterminer si une endotoxine est présente ou non.

LAB Les associés terminent généralement ces trois tests d'endotoxine bactériens deux ou trois fois afin d'assurer des résultats précis.Le test de gel n'est pas utilisé exclusivement car sa limite de détection la plus basse est de 0,03 unités d'Ehrlich par millilitre (UE / ml).Les tests chromogènes et turbidimétriques détectent les endotoxines dans la gamme 0,005 UE / ML.Les paramètres de sécurité diffèrent considérablement en fonction de la substance testée.Alors que l'eau stérile utilisée à des fins d'injection ou d'irrigation peut ne pas contenir plus de 0,25 UE / ml, de l'eau stérile à des fins d'inhalation peut contenir jusqu'à 0,5 UE / ml.