Quelles sont les étapes de la procédure ELISA?

La procédure ELISA commence à la clinique, un échantillon de sang étant prélevé du patient.Un certain nombre d'étapes sont ensuite suivies à l'aide du kit de test ELISA en laboratoire.Le test détectera la présence d'anticorps ou d'antigènes à une maladie, comme le VIH, dans le sang.Les étapes incluent l'ajout de diverses substances et le lavage et les résultats sont généralement mesurés par un changement de couleur.

Le test d'immunosorbant lié à l'enzyme (ELISA), qui est également appelé l'immunodosage enzymatique (EIA), est utilisé comme test de diagnostic.Il est très bien connu comme un test de diagnostic pour le VIH.La plaque d'essai se compose généralement de 96 petits puits dans lesquels un antigène spécifique est immobilisé.Si l'anticorps est présent dans l'échantillon de sérum, il se liera à l'antigène, permettant la détection via les différentes étapes de la procédure ELISA.

La première étape de la procédure ELISA est d'obtenir un échantillon du patient.Cela se fait par une infirmière, dans des conditions stériles.Le sang est généralement prélevé dans une veine dans le bras ou la main.Un garrot est placé sur le bras pour gonfler la veine et faciliter la procédure et la peau est nettoyée lorsque l'aiguille sera insérée.Une petite piqûre peut être ressentie lorsque l'aiguille entre et que le sang sera prélevé dans un tube stérile.

Une fois l'échantillon de sang prélevé, il est transféré au laboratoire où le reste de la procédure ELISA sera effectué par un laboratoiretechnicien.L'échantillon de sang est d'abord ajouté aux puits de la plaque ELISA.Si l'anticorps spécifique est présent, il se lie à l'antigène.La plaque est ensuite lavée, à l'aide d'un tampon, pour éliminer les anticorps non liés.

Un deuxième anticorps, normalement d'origine animale, qui a une enzyme qui lui est attachée, est ensuite ajouté, qui se liera au complexe anticorps-antigène.La plaque est à nouveau lavée pour éliminer l'excès.L'enzyme est réactive par les couleurs lorsqu'un substrat est ajouté à la fin de la procédure ELISA.C'est la mesure du degré de changement de couleur qui donne le résultat.

La procédure ELISA doit être suivie attentivement pour éviter de faux résultats.Dans la plupart des plaques ELISA, un contrôle positif et négatif est inclus, pour minimiser ces faux résultats.Lors du test du VIH, un résultat positif sera généralement suivi d'une seconde, de confirmation, test, souvent d'un type différent, comme un Western blot.