Qu'est-ce qu'un anticorps de biotine?

Contrairement à ce que l'on pourrait penser, un anticorps de biotine n'est pas une substance soulevée contre la biotine.Un anticorps de biotine est plutôt un anticorps qui a été conjugué à la biotine.La biotine se lie fortement à un ligand mdash;Avidin mdash;qui peut, à son tour, être conjugué à des molécules détectables de la lumière telles que les fluorophores.La biotine et l'avidine forment l'une des liaisons covalentes biologiquement pertinentes les plus fortes connues, ce qui rend les unités de ligand / récepteurs conjuguées à la biotine et à l'avidine particulièrement utiles dans les études scientifiques.

La biotine est une vitamine B-complexe B mdash;vitamine B7.C'est une si petite molécule que plusieurs molécules de biotine peuvent être conjuguées à un seul anticorps monoclonal ou polyclonal.Le fait que la biotine soit également soluble dans l'eau permet une plus grande polyvalence dans les systèmes tampons que s'il était insoluble.Pour une plus grande spécificité, la conjugaison des anticorps monoclonaux à la biotine est souvent recommandée sur la conjugaison des anticorps polyclonaux.La molécule de biotine peut être directement liée à l'anticorps d'intérêt, ou il peut être lié par une queue moléculaire pour permettre plus de liberté de mouvement.

Le ligand de biotine Avidine se trouve dans l'albumine d'oeuf.Il peut être fabriqué à moindre coût et facilement isolé.Plusieurs molécules d'avidine se lieront à chaque récepteur de la biotine, amplifiant un seul signal de détection d'anticorps.Lorsqu'un anticorps de biotine adhère à un antigène d'intérêt, un expérimentateur peut alors exposer le complexe à Avidin conjugué à des fluorophores, ce qui rend le complexe détectable.Grâce à l'imagerie fluorescente, l'anticorps de biotine et le ligand conjugué à l'avidine peuvent être détectés avec la microscopie optique, et les antigènes d'intérêt peuvent être étudiés

in situ .

Bien que la création et l'utilisation d'un anticorps biotine et d'une molécule Avidine tague par fluorescence soientSolution commune pour la détection de l'antigène, des alternatives existent qui utilisent toujours le complexe de biotine / avidine.La liaison de la biotine à un ligand comme une neurotoxine peut être avantageuse dans la détection du placement des récepteurs neuronaux affectés par la neurotoxine en question.Il est également possible de conjuguer la biotine à une séquence nucléotidique telle que l'acide ribonucléique messager (ARNm) pour trouver où ces séquences nucléotidiques sont traduites en protéines ou pour détecter la régulation de l'ARNm cellulaire.bien que la production d'anticorps biotinylée soit dans la capacité de nombreux expérimentateurs.Les protocoles peuvent être trouvés en ligne suggérant des méthodes de biotinylation des anticorps, bien que les protocoles les plus facilement suivis relient directement la biotine à un anticorps plutôt que de suggérer comment intercalater un espaceur moléculaire.Les espaceurs moléculaires entre la biotine et son anticorps associé permettent à un plus grand espacement de exposer plus de molécules aux sites de liaison, et ces anticorps biotine sont généralement achetés plutôt que fabriqués.