Quel est le but de l'élimination des endotoxines?
L'endotoxine est un contaminant commun des produits médicaux qui découle des bactéries.La présence de l'endotoxine peut provenir de composants intrinsèques du processus de fabrication ou de la contamination accidentelle du produit.L'endotoxine peut provoquer l'endotoxique et le mdash;ou septique mdash;choc, blessure aux tissus et même mort.L'élimination de l'endotoxine avant l'approbation du médicament pour la libération est donc nécessaire pour éviter de provoquer une maladie chez le receveur d'un médicament.
La contamination par l'endotoxine se produit lorsqu'un certain groupe de bactéries, appelées bactéries à Gram négatif, est présente, ou a été présente, dans leprocessus de fabrication.Les bactéries se divisaient généralement en deux groupes, le Gram négatif et le Gram positif, les bactéries Gram négatives sont extrêmement courantes.La désignation à Gram négative découle de l'apparition des bactéries après qu'un processus de coloration spécifique, appelé coloration de Gram, a été effectué.L'endotoxine est présente dans toutes les bactéries à Gram négatif, qu'elles provoquent une maladie.
La partie extérieure d'une bactérie à Gram négative contient des lipopolysaccharides (LPS) utilisés pour la stabilité structurelle.L'endotoxine fait référence à cette partie LPS de la bactérie.Par exemple, une cellule E. coli contient environ 2 millions de molécules de LPS.Le LPS n'est pas seulement présent dans les cellules des bactéries vivantes ou mortes, mais sont également en continu dans l'environnement.La libération se produit pendant la croissance et la division de la bactérie et lorsque la cellule meurt.
La molécule LPS a un effet indirectement délétère sur le corps.L'endotoxine interagit avec le système immunitaire par liaison avec des cellules dans le sang appelé macrophages et monocytes.Cette liaison provoque une réponse inflammatoire en libérant des facteurs tels que l'interleukine-6, l'interleukine-1 et le facteur de nécrose tumorale.Cette réponse inflammatoire conduit à la fièvre et, parfois, au choc endotoxique et à la mort.
Ces effets dangereux se produisent soit avec une seule dose élevée d'endotoxine, soit avec des niveaux d'exposition plus faibles répétés.Une dose de 1 nanogramme de LPS par millilitre de produit peut invoquer une réaction endotoxique chez les mammifères lorsque le produit est injecté par voie intraveineuse.Les personnes atteintes de maladies telles que le SIDA, la leucémie ou le diabète sont particulièrement à risque de choc endotoxique.
Les bactéries Gram négatives génétiquement modifiées sont régulièrement utilisées dans la production de protéines et de peptides biologiquement actifs.La présence des molécules LPS dans les cellules productrices et la culture environnante signifie que le produit nécessite une purification et une élimination des endotoxines.Le lipopolysaccharide est une molécule très stable par rapport aux protéines, résistant à un pH et à des températures extrêmes, donc l'élimination de l'endotoxine nécessite des techniques d'élimination complexes.Les fabricants utilisent donc des méthodes telles que la chromatographie d'échange d'ions, l'ultrafiltration et la chromatographie basée sur la membrane pour l'élimination ou la réduction de l'endotoxine à un niveau acceptable.