Qu'est-ce que l'électrophorèse sur gel 2D?

L'électrophorèse sur gel bidimensionnelle (2D) est une méthode que les scientifiques utilisent pour démonter et analyser les mélanges de protéines en séparant d'abord les bandes de protéines le long de deux axes différents.Il s'agit d'une technique qui est le plus souvent utilisée lorsqu'il s'agit de mélanges complexes ou épais de protéines, souvent avec des tailles de protéines qui se chevauchent.L'électrophorèse sur gel 2D diffère de l'électrophorèse sur gel unidimensionnelle car la première méthode utilise une séparation des protéines basée sur deux caractéristiques de protéines différentes, tandis que l'électrophorèse sur gel unidimensionnelle sépare généralement les protéines basées sur une seule caractéristique, comme la taille des protéines.Utilisé dans la recherche pour séparer les molécules en utilisant le fait que de nombreuses molécules biologiques, comme l'ADN, ont une charge électrique.Ce fait peut être utilisé à l'avantage des scientifiques car les molécules chargées peuvent être séparées par la taille par un substrat poreux comme l'agarose en appliquant un gradient de tension à travers un gel ionique poreux.Au fil du temps, les molécules passeront à travers ce gel, vers la charge qui est opposée à la charge naturelle de la molécule.Les petites molécules et les molécules fortement chargées se déplacent toutes deux plus rapidement que les grandes molécules ou les protéines faiblement chargées.Dans l'électrophorèse sur gel 2D, après avoir séparé les protéines par une seule caractéristique, ce qui crée un gradient, un gel peut ensuite être tourné de côté pour séparer les bandes qui en résultent précédemment en fonction d'une deuxième caractéristique.

L'électrophorèse sur gel 2D utilise souvent des charges moléculaires de protéines comme une seulecaractéristique par laquelle les agrégats de protéines peuvent être séparés en protéines à composants uniques.La masse des protéines est une autre caractéristique courante utilisée pour séparer les protéines de l'électrophorèse sur gel 2D.Une fois les protéines exécutées sur un gel à travers une seule voie dans l'électrophorèse sur gel unidimensionnelle, ce gel peut ensuite être tourné dans une centrifugeuse, tirant les protéines plus lourdes plus rapidement que les protéines plus petites et moins massives.La direction de la traction est perpendiculaire à la direction dans laquelle les protéines ont été dessinées à travers le gel en raison de l'attraction d'une charge électrique par un gradient de tension.Tagging.La séparation des protéines basée sur une masse caractéristique est également utilisée lorsque les protéines sont marquées avec d'autres molécules.Cette technique peut être utilisée avec ces complexes de protéines car les protéines étiquetées tomberont plus facilement à travers un gel que les protéines non marquées.

Alors que de nombreux gels de séparation dans les laboratoires sont en a agarose, la séparation des protéines par électrophorèse sur gel 2D est mieux réalisée sur des gels de polyacrylamide.Ces types de gels sont utilisés dans Western Blots et d'autres tests basés sur la taille des protéines.L'agarose est plus souvent utilisée pour la séparation des segments d'ADN.