Qu'est-ce qu'un microscope confocal?

Un microscope confocal est un type particulier de microscope fluorescent utilisé pour obtenir des images 2D et 3D de haute qualité.Avec un microscope fluorescent de base (large champ), la lumière d'une longueur d'onde particulière, est brillante sur un échantillon, et l'échantillon absorbe une partie de cette lumière et reflète le reste à une longueur d'onde plus longue.La lumière de longueur d'onde plus longue passe à travers un miroir dichroïque, ce qui permet la lumière de longueur d'onde plus longue, mais pas la lumière de longueur d'onde d'origine (plus courte) pour passer.La personne visant l'échantillon ne voit que la lumière qui a traversé le miroir dichroïque.Les microscopes fluorescents de base capturent à la fois la lumière au point et hors de focus, ce qui fonctionne bien pour les grands spécimens où une très haute résolution n'est pas requise.Cela ne fonctionne pas si bien pour consulter les détails fins.Un microscope confocal est nécessaire pour capturer des images fluorescentes à haute résolution.

Le microscope confocal utilise un trou d'épingle pour rejeter la lumière hors focus.Au lieu de la lumière qui ne passe que par un miroir dichroïque, la lumière passe à la fois à la fois à un miroir dichroïque et à un trou d'épingle, ce qui signifie que la personne visant l'échantillon ne voit qu'un seul point de l'échantillon.Afin de visualiser un échantillon entier, les miroirs mobiles scannent la lumière à travers un plan rectangulaire de l'échantillon, et un ordinateur recueille la lumière émise à mesure que l'échantillon est scanné.Une analyse complète entraînera une tranche optique, ou section transversale de l'échantillon.Ce type de microscopie est appelé microscopie confocale à balayage laser, en partie parce qu'un laser est utilisé comme source de lumière.

pour créer une image 3D, plusieurs scanneCréez une image en trois dimensions.Le microscope peut être programmé pour varier l'espace entre les tranches, en fonction de la croustillation d'une image 3D que l'utilisateur souhaite obtenir.Le microscope peut également varier la vitesse à laquelle il scanne une image, avec un balayage lent donnant une résolution plus élevée que le balayage rapide. Le microscope confocal est devenu un équipement très couramment utilisé dans de nombreux laboratoires de science-vie.Ils sont chers et un peu grands, et ont souvent des chambres dédiées à leur utilisation, car la pièce doit être sombre afin d'obtenir une bonne image fluorescente.Bien que les microscopes confocaux soient le plus souvent utilisés pour visualiser les cellules et les structures dans les cellules, elles peuvent être utilisées pour obtenir une image de tout échantillon fluorescent en trois dimensions, et sont parfois utilisées pour visualiser les matériaux semi-conducteurs.