Come funziona i test batterici di endotossina?

Il test di endotossina batterica comporta in genere l'uso di reagenti che, se miscelati in una soluzione con un possibile contaminante, causano una reazione, che indicano la presenza di un'endotossina.I test cromogenici, il test del coagulo di gel e i test torbidimetrici sono i metodi che gli scienziati impiegano comunemente per i test di endotossina batterica.I tecnici utilizzano questi metodi di valutazione su una varietà di sostanze e oggetti quando si verificano la contaminazione da endotossina.L'acqua, le materie prime utilizzate per creare farmaci, attrezzature e imballaggi devono passare tutti gli standard di endotossina.

batteri, funghi e virus hanno tutti membrane esterne protettive costituite da lipopolisaccaridi, anche indicati come LPS.La parte lipidica di queste catene contiene endotossine.Queste sostanze generalmente rimangono all'interno della membrana ma vengono rilasciate durante il processo di divisione cellulare e durante la distruzione cellulare o la lisi.Nell'uomo, queste sostanze causano febbre, coagulazione anormale, shock settico e altri sintomi, sebbene diversamente dalle esotossine all'interno della cellula, le endotossine non si convertono in un toxoide.In generale, i microbiologi controllano la presenza di endotossine associate a vari batteri Gram-negativi, tra cui e.coli .

Il test del coagulo di gel o il test lisato di ameboecyte limulus (LAL), prevede l'uso di una sostanza chimica che distruisce la membrana derivata dagli amebociti del granchio a ferroo la gelificazione si verifica quando il lisato è esposto all'oggetto o alla sostanza in questione.I microbiologi in genere usano questo metodo di test endotossina batterica in combinazione con test cromogenici e torbidimetrici per risultati conclusivi.

tivamente Test di endotossina hadazione ha utilizzato un LAL apptivamente trattato.Quando questo lisato contatta un'endotossina, la reazione produce un colore specifico.Il processo di test finale include la misurazione della torbidità o della nuvolosità della soluzione.I tecnici espongono la soluzione formata nel test del coagulo di gel a uno spettrofotometro, che emette un raggio di luce.Misurando la perdita di intensità della luce nel raggio mentre passa attraverso la soluzione, i microbiologi possono determinare se è presente o meno un'endotossina. I associati di laboratorio generalmente completano questi tre test di endotossina batterica due o tre volte al fine di garantire risultati accurati.Il test di gel non viene utilizzato esclusivamente poiché il suo limite di rilevamento più basso è 0,03 unità Ehrlich per millilitro (UE/mL).I test cromogenici e torbidimetrici rilevano endotossine nell'intervallo di 0,005 eu/ml.I parametri di sicurezza differiscono notevolmente a seconda della sostanza da testare.Mentre l'acqua sterile utilizzata per scopi di iniezione o irrigazione non può contenere più di 0,25 UE/mL, l'acqua sterile a fini di inalazione può contenere fino a 0,5 UE/mL.