Quali sono i diversi tipi di kit di isolamento dell'RNA?
La maggior parte dei kit di isolamento dell'acido ribonucleico (RNA) possono isolare l'RNA di alta qualità da una vasta gamma di tessuti e tipi di organismi, tra cui piante, animali e virus. L'RNA mitocondriale e ribosomiale - mRNA e rRNA, rispettivamente, può richiedere kit di isolamento di RNA specializzati specifici per piccoli fili di RNA. Altri fattori che possono differire tra i vari kit di isolamento sono la quantità di campioni che ogni kit può elaborare e il tempo impiegato per elaborare completamente un campione.
I tipi più comuni di kit di isolamento dell'RNA possono essere utilizzati per una grande varietà di applicazioni, indipendentemente da da dove proviene l'RNA. Le cellule e i tessuti dei mammiferi sono tra le fonti più predominanti utilizzate per l'isolamento e la purificazione dell'RNA. Le cellule vegetali e i virus sono anche utilizzati in esperimenti di biologia molecolare che richiedono l'uso di un kit di isolamento dell'RNA.
Una volta raccolto il tessuto o il campione di sangue, deve essere preparato per l'isolamento dell'RNA durante un processo critico noto come degradazione cellulare, separatio interruzione. Se il materiale cellulare non viene completato interrotto, il processo di isolamento dell'RNA produrrà meno RNA. I migliori kit di isolamento dell'RNA includono materiali e forniture per la degradazione cellulare prima dell'isolamento e della purificazione dell'RNA dopo l'isolamento.
In casi speciali in cui un esperimento richiede mRNA o rRNA, sono disponibili kit di isolamento RNA specializzati per fili di RNA particolarmente piccoli. I materiali e le forniture inclusi in tale kit possono essere diversi in termini di quantità e dimensioni. Questi kit di isolamento dell'RNA sono meno comuni dei kit di RNA multiuso e potrebbe esserci una differenza di costo sostanziale.
Molti kit di isolamento dell'RNA comuni sono progettati per l'uso con tutti i tipi di tessuti e cellule e possono completare una reazione in circa 20 minuti. Il tempo impiegato per la degradazione cellulare completa può variare a seconda di dove nell'organismo le cellule erano ColLected. Oltre alla fase della degradazione cellulare, il processo di isolamento dell'RNA e la successiva purificazione sono relativamente standard in termini di procedura e tempo.
Un'altra caratteristica che può essere specifica per determinati kit è la quantità di campione richiesta per elaborare la reazione. Mentre alcuni kit di isolamento possono richiedere un volume del campione relativamente grande, altri kit possono funzionare bene con un volume inferiore. Questa differenza può essere un vantaggio se il volume del campione è un fattore limitante.
Diversi produttori di kit di isolamento dell'RNA hanno grafici di confronto disponibili su Internet. Questi grafici possono essere usati per vedere le differenze tra i vari kit che producono. Le differenze possono includere tipi di applicazione specializzati, sostanze chimiche e volumi di campioni necessari.