Cos'è un microscopio confocale?

Un microscopio confocale è un particolare tipo di microscopio fluorescente utilizzato per ottenere immagini 2D e 3D di alta qualità.Con un microscopio fluorescente di base (a campo largo), la luce di una particolare lunghezza d'onda, viene brillare su un campione e il campione assorbe parte di quella luce e riflette il resto a una lunghezza d'onda più lunga.La luce della lunghezza d'onda più lunga passa attraverso uno specchio dicroico, che consente di passare la luce della lunghezza d'onda originale (più corta).La persona che visualizza il campione vede solo la luce che è passata attraverso lo specchio dicroico.I microscopi fluorescenti di base catturano sia la luce in focus che fuori focus, che funziona bene per campioni di grandi dimensioni in cui non è necessaria una risoluzione molto elevata.Non funziona così bene per visualizzare dettagli raffinati.È necessario un microscopio confocale per catturare immagini fluorescenti ad alta risoluzione.

Il microscopio confocale utilizza un foro stenopeico per respingere la luce fuori messa a fuoco.Invece di passare solo attraverso uno specchio dicroico, la luce viene passata attraverso uno specchio dicroico, sia un foro stenopeico, il che significa che la persona che visualizza il campione vede solo un singolo punto del campione.Per visualizzare un intero campione, gli specchi mobili scansionano la luce su un piano rettangolare del campione e un computer raccoglie la luce emessa mentre il campione viene scansionato.Una scansione completa si tradurrà in una fetta ottica, o sezione trasversale, del campione.Questo tipo di microscopia è chiamato microscopia a scansione laser confocale, in parte perché un laser viene utilizzato come sorgente luminosa.

Per creare un'immagine 3D, vengono eseguite diverse scansioni, creando diverse fette del campione e un computer combina ogni fetta aCrea un'immagine tridimensionale.Il microscopio può essere programmato per variare lo spazio tra le fette, a seconda di quanto fresco un'immagine 3D che l'utente desidera ottenere.Il microscopio può anche variare la velocità con cui scansiona un'immagine, con una scansione lenta che dà una risoluzione più elevata rispetto alla scansione rapida.

Il microscopio confocale è diventato un pezzo di equipaggiamento molto comunemente usato in molti laboratori della scienza della vita.Sono costosi e un po 'grandi e spesso hanno stanze dedicate al loro uso, perché la stanza deve essere scura per ottenere una buona immagine fluorescente.Sebbene i microscopi confocali siano più comunemente usati per visualizzare cellule e strutture all'interno delle cellule, possono essere utilizzati per ottenere un'immagine di un campione fluorescente tridimensionale e talvolta vengono utilizzati per visualizzare i materiali a semiconduttore.