Cos'è l'analisi del ciclo cellulare?
L'analisi del ciclo cellulare è una tecnica utilizzata nella ricerca biochimica per identificare e analizzare la fase di una cellula biologica.Durante la sua vita, una cellula passa attraverso una serie di fasi cicliche che collettivamente sono note come ciclo cellulare.La quantità di acido deossiribonucleico (DNA) nella cellula cambia in base alla fase.Nell'analisi del ciclo cellulare, il DNA della cellula è colorato con un colorante fluorescente, consentendo ai ricercatori di determinare la quantità di DNA presente e dove si trova la cellula nel suo ciclo.
Il ciclo cellulare è costituito da due ampie fasi: interfase e mitosi.L'interfase consiste nella preparazione per la divisione della cellula, o mitosi, che è anche chiamata fase M.La maggior parte del ciclo di vita della cellula è speso a prepararsi per la mitosi, che è breve al confronto, quindi l'interfase è suddivisa in tre parti: fase G1, fase S e fase G2.
In G1, la cellula riguarda principalmente la crescita.Durante la fase S, le informazioni genetiche della cellula sotto forma di DNA vengono replicate in preparazione per la sua divisione in due cellule figlie.In G2, la cellula si prepara alla divisione, che porta alla fase M.Dopo la mitosi, la cellula ritorna alla sezione G1 dell'interfase e il ciclo ricomincia.Le cellule che per qualche motivo si smettono di dividere lasciano il ciclo ed esistono inintosamente in quella che è nota come fase G0.
La cellula replica il suo DNA durante la fase S, quindi c'è il doppio del DNA nella cellula durante G2 e M rispetto aè in G1 o G0.I ricercatori utilizzano queste informazioni nell'analisi del ciclo cellulare per determinare la fase cellulare.L'analisi del ciclo cellulare può anche rivelare anomalie nel DNA cellulare.
La tecnica utilizzata nell'analisi del ciclo cellulare è nota come citometria a flusso.Innanzitutto, un colorante fluorescente viene introdotto nella cellula che tocca le molecole del DNA legandosi chimicamente con loro.I ricercatori usano quindi uno strumento chiamato citometro per determinare l'intensità della fluorescenza della cellula.Una fluorescenza più elevata indica che più colorante è stato in grado di legarsi e mostra che c'è più DNA nella cellula.
Di solito, l'analisi del ciclo cellulare viene utilizzata su un raggruppamento di cellule.Un tipo di grafico chiamato istogramma viene generato dai dati, spesso mostrando due picchi distinti: uno che mostra la popolazione di cellule nella fase G1 e un altro mdash;Due volte più alto mdash;mostrando quelli nella fase G2.Il picco di fase G2 è due volte più alto perché le cellule di quella popolazione contengono il doppio della quantità di DNA come quelle del picco G1.Le cellule che si trovano nella fase S, che sono ancora in fase di replica del DNA, si presentano sul grafico a un livello intermedio tra i due picchi.