Qual è il polimorfismo della lunghezza del frammento di restrizione?

Un polimorfismo della lunghezza del frammento di restrizione, o RFLP, è una variazione nelle sequenze omologhe del DNA.I polimorfismi sono le variazioni del DNA omologa che si verificano tra gli individui, mentre il termine restrizione si riferisce al fatto che piccole sezioni di DNA possono essere tagliate da un pezzo grande usando enzimi di restrizione.Alcune sezioni di DNA hanno più variabilità di altre e le sezioni con un alto grado di variabilità sono utili nell'analisi del polimorfismo della lunghezza del frammento di restrizione. Il polimorfismo della lunghezza del frammento di restrizione si basa sull'attività delle endonucleasi di restrizione.Questa classe di enzimi si trova in molte specie batteriche.In un batterio, il ruolo delle endonucleasi di restrizione è quello di fornire protezione contro il DNA estraneo che guadagna l'accesso, rompendolo in pezzi.Nella ricerca molecolare, gli enzimi di restrizione possono essere utilizzati per frammento di DNA in siti noti di variabilità in modo che i frammenti risultanti possano essere analizzati.

Ogni tipo di enzima riconosce una specifica sequenza di coppie di base di DNA e agisce per scindere la molecola del DNA in qualsiasi puntodove riconosce la sequenza.I batteri proteggono il proprio DNA dall'essere rotti con un modello distintivo di metilazione del DNA che impedisce il legame endonucleasi di restrizione.Sono state scoperte più di 800 diverse endonucleasi di restrizione, che insieme riconoscono più di 100 sequenze nucleotidiche uniche.Le sequenze più riconosciute sono tra le quattro e le sei coppie di basi di lunghezza. Gli enzimi di restrizione

sono usati in biotecnologia per analizzare il polimorfismo della lunghezza dei frammenti di restrizione per una serie di ragioni.Gli enzimi vengono utilizzati per ridurre le lunghezze del DNA a determinate sequenze in modo che le differenze tra gli individui possano essere esaminate.Le soluzioni di DNA frammentato, tagliate a determinate sequenze di nucleotidi note, sono ibridate con sonde progettate per rilevare sequenze di DNA predefinite.I campioni vengono quindi analizzati utilizzando l'elettroforesi su gel.Questa tecnica produce un gel con più bande di colorazione scura, ognuna delle quali rappresenta un diverso frammento di DNA.Esaminando il modello di colorazione, gli scienziati possono determinare il modello di RFLP presenti in un campione. I polimorfismi

si verificano ampiamente in tutto il genoma umano e l'analisi di questi ha dimostrato che diversi gruppi di persone tendono a condividere gli RFLP in comune.Alcuni tipi di RFLP sono comuni a persone di diversi gruppi etnici o origini geografiche, ad esempio, e il collegamento esiste anche all'interno dei gruppi familiari.Questa variazione esiste in tutto il regno animale, rendendolo un utile strumento di ricerca non solo per la traccia di origine umana, ma anche per lo studio della migrazione e dell'evoluzione della fauna selvatica. L'analisi dei polimorfismi di lunghezza dei frammenti di restrizione può fornire informazioni utili a scopi clinici e medici.Le sonde del polimorfismo della lunghezza del frammento di restrizione sono utilizzate nei test di paternità, nella diagnosi di malattie ereditarie, nella scienza forense e nella genotipizzazione.L'analisi dei modelli di RFLP in un intero genoma è la base dell'impronta digitale del DNA, la tecnica che è la base di tutti questi diversi usi.