Qual è il metodo Kjeldahl?

Gli scienziati usano il metodo Kjeldahl per analizzare la percentuale di azoto organico in una sostanza.I livelli di azoto possono quindi essere utilizzati per determinare la quantità di proteina.Il nome completo del metodo è il metodo Kjeldahl di analisi dell'azoto e mdash;A volte l'analisi delle proteine viene utilizzata al posto dell'analisi dell'azoto, ma i termini si riferiscono allo stesso metodo.

Il chimico Johan Kjeldahl ha presentato il suo metodo alla società chimica danese nel 1883. Ha stabilito che, poiché l'azoto è un elemento importante nella proteina,L'analisi dell'azoto potrebbe essere utilizzata per determinare la quantità di proteina in una sostanza.Le sue scoperte sono state migliorate da allora, ma il metodo di base rimane in atto.

Il metodo Kjeldahl è costituito da tre fasi, comunemente definite digestione, distillazione e titolazione.La digestione scompone l'azoto in ammoniaca e la distillazione separa l'ammoniaca da altri componenti.La quantità di ammoniaca viene calcolata usando la titolazione, quindi le quantità di azoto e proteina possono essere calcolate in base alla quantità di ammoniaca.e un catalizzatore che accelera la reazione.Questa miscela è riscaldata a una temperatura molto elevata e mdash;fino a 750 deg; f (circa 400 deg; c) mdash;Per circa un'ora, poi raffreddato.Le reazioni che si svolgono nella miscela riscaldata scompongono grandi molecole in componenti più piccoli, tra cui ioni di ammonio.

La fase di distillazione converte gli ioni di ammonio in gas di ammoniaca aggiungendo idrossido di sodio alla miscela.Quindi la temperatura della soluzione viene sollevata, convertendo l'ammoniaca in un gas volatile che aumenta in un vapore.I vapori sono intrappolati in una soluzione, come acido cloridrico o acido borico.

L'ammoniaca intrappolata in un acido neutralizza parte dell'acido, il che significa che abbassa il pH.La quantità di acido lasciato dopo questa neutralizzazione è titolata con una base, come l'idrossido di sodio.Un colorante viene aggiunto alla soluzione acida e ammoniaca, che cambia colore quando il pH cambia.Quindi piccole quantità di base vengono aggiunte all'acido fino a quando la soluzione non cambia colore.La quantità di base necessaria per raggiungere questo endpoint può essere utilizzata per calcolare la quantità di ammoniaca nella soluzione originale.

Per calcolare la quantità di azoto, uno scienziato deve prima conoscere il numero di moli di acido e base presenti nelsoluzione finale.Sottraendo le moli di base dalle moli dell'acido dà le moli di ammoniaca.Le moli di ammoniaca nella soluzione finale sono le stesse delle moli di azoto, quindi questo numero viene moltiplicato per 14 mdash;la massa atomica di azoto e mdash;per trovare i grammi di azoto.

Per cento di azoto si trova dividendo i grammi di azoto per i grammi totali nel campione originale e moltiplicando per 100. La percentuale di proteina Il metodo Kjeldahl si trova moltiplicando l'azoto percentuale per un fattore di conversione.Questo fattore di conversione è generalmente 6,25, ad eccezione di alcune sostanze come i prodotti lattiero -caseari.