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ペプチド精製とは何ですか?

Peppidesは、アミノ酸で構成される小さなポリマーです。多くは、ホルモン、毒素、または他の能力を持っているように生物学的に活性です。このような化合物は、生物学的、医学的、化学的研究で頻繁に使用されます。また、タンパク質の数がリンクされている場合、タンパク質の構成要素としても機能します。ペプチド精製は、目的のペプチドを大量に精製するか、タンパク質の消化から生成されたペプチドを分離するのに役立つ技術です。物理マトリックスと差別的に。高圧液体クロマトグラフィー(HPLC)は、一般的にペプチド精製に使用されます。ペプチドまたはペプチドは、高圧で小さなビーズの柱に汲み上げられると時間とともに変化する溶媒の混合物に塗布されます。さまざまなペプチドがさまざまな時点で溶出し、モニター、しばしばUV分光光度計によって検出されます。目的のペプチドの構造がわかっている場合、自然源から化合物を分離するよりも、ペプチド合成によって化学的に調製する方が頻繁に簡単です。天然物の分離は難しいことで有名です。合成ペプチドは一般にHPLCによって精製されます。多くの場合、このタスクは、これらの技術を専門とするペプチド合成会社と契約されています。これは、研究室でシステムをゼロからセットアップしようとするよりも経済的かもしれません。ペプチド企業は、研究者のニーズに合わせてカスタムペプチドを作ることができます。彼または彼女は、タンパク質をペプチドフラグメントに分解し、精製によって断片を分離し、カラムから溶出するときに質量分析計によって検出されたペプチドの断片化パターンを持つことができます。この手法は、LC-MSとして知られており、液体クロマトグラフィマス分析の略です。断片の分子量とアミノ酸組成を与え、類似または同一のものが以前に特定されている場合、タンパク質の同定を可能にします。異常な生物学的活動のあるものを試してみてください。そのような新規ペプチドの研究に充てられたペプチド模倣学と呼ばれる全体の分野があります。多くの場合、コンピューターで生成された配列が設計されており、さまざまな非定型ペプチドを含むペプチドライブラリーが合成されます。ペプチド精製は、このライブラリの個々のメンバーを分離して、生物活性をテストするために純粋なペプチドを提供します。この戦略は、少なくとも1つの新しい市販の薬物を生成することに成功しています。インスリンなどの商業的に使用される化合物は、一般に、目的の化合物の大量を生成する組換えDNA過剰発現システムによって生成されます。多くの場合、ペプチドは、何らかのタグを前面に追加することにより、精製を促進するために遺伝子組み換えされています。これにより、アフィニティクロマトグラフィーを使用してペプチドを精製できます。このタイプのクロマトグラフィーでは、タグはヒスチジンなどの化合物であり、ニッケルのようなビーズのマトリックスに結合し、タグを結合する能力のために選択されます。不要なタンパク質とペプチドは一般に、結合せずにカラムを通過します。特異的に設計されたペプチドは、通常、カラムに強く結合します。汚染タンパク質とペプチドが洗い流された後、Tへの結合を競う化合物によって希望のペプチドが溶出されます彼はマトリックスです。その後、目的のペプチドのかなり純粋な調製があり、切断によってタグを除去できます。