바이 설 파이트 시퀀싱이란 무엇입니까?

bisulfite 시퀀싱은 메틸화를 사용하여 DNA의 상이한 영역을 분석하는 방법이다.메틸화는 메틸기라고하는 특정 분자를 뉴클레오티드에 첨가하는 과정,이 경우 일반적으로 시토신입니다.비활성 뉴클레오티드는 종종 메틸화 되므로이 방법은 게놈의 활성 영역을 결정하는 것에서부터 유전자가 풍부한 영역을 식별하는 것까지 다양한 목적으로 사용될 수 있습니다.Bisulfite 시퀀싱에서, 메틸화 된 시토신은 시퀀싱 공정에 의해 영향을받지 않는 반면, 비 메틸화 된 시토신은 유전자 물질에서 일반적으로 발견되지 않은 뉴클레오티드 인 Uracil로 전환되는 반면,이 방법은 변화에 매우 민감하다.메틸화, 따라서 결합의 작은 변화는 연구원들에게 특정 뉴클레오티드에 대한 특정 정보를 제공 할 수 있습니다.바이 설 파이트 나트륨은 시토신을 우라실로 전환하지만, 메틸화 된 시토신이 이러한 변화를 겪지 않는 환경에서 전환이 발생합니다.바이 설 파이트 시퀀싱이 완료되면, 원래 DNA는 상당히 다른 분자로 전환되었다.시토신은 크게 고갈되거나 잠재적으로 결석됩니다.이 전환 된 분자에서 시토신이 여전히 발견되는 경우, 이는 고려중인 게놈에서 자연적으로 메틸화 된 시토신을 나타냅니다.가장 중요한 단점은 제대로 작동하기 위해 매우 높은 소금 농도가 필요하다는 것입니다.소금은 단일 가닥 DNA의 더 자연스러운 이중 나선으로 어닐링을 장려하고, 바이 설 파이트 나트륨은 이중 가닥 DNA의 일부일 때 항상 시토신에 도달 할 수 없습니다.염 농도가 너무 높으면, 다수의 시토신이 우라실로 전환되지 않을 수있어서 게놈 내에서 메틸화 된 시토신의 잘못된 식별을 초래한다.변성 제제는 잘못된 양성 식별의 수를 최소화하기 위해 필요할 수있다.원래의 핵산 공급원은 중요하지 않지만 소스는 DNA 여야합니다.이론적으로, 리보 핵산 (RNA) 은이 방법을 사용하여 시퀀싱 될 수있다. 왜냐하면 대부분의 RNA는 단일 가닥이고 뉴클레오티드가 차단되어 오 탐지에 취약하지 않기 때문이다.그러나, 실습 할 때, 바이 설 파이트 시퀀싱은 RNA에 유용하지 않다. RNA는 자연적으로 우라실을 가지고 있기 때문이다.일종의 외부 표시 또는 프로토콜에 추가되지 않으면, 전환 된 시토신은 자연적인 우라실과 구별 할 수 없을 것이다.바이 설 파이트 시퀀싱과 같은 민감한 방법은 신뢰할 수있는 서열 분석 수단을 제공하며, 이는 유전자 분석 및 약물 및 치료에 대한 표적의 확인을 허용한다.이 방법은 살아있는 사람들에게 사용할 수는 없지만 여전히 작용하는 가장 작은 조직 샘플에만 큰 도움이 될 수 있습니다.