등전 지점은 무엇입니까?

proteins 단백질은 아미노산 사슬로 구축되며, 각각은 다른 pH 값을 갖는다.단백질의 전체 pH는 이들이 용해되는 특정 용액에서 이온을 형성함에 따라 개별 아미노산의 pH 값의 혼합물로 구성된다.단백질의 등전점 (PI)은 그 단백질에 순 전하가없는 pH입니다.이 특성은 이질적인 혼합물에서 다른 단백질로부터 알려진 PI로 단백질을 분리하기 위해 이용 될 수있다.

아미노산은 기본적인 아미노 말단기를 가지고 있으며, pH가 높다.아미노산의 다른 쪽 끝은 산성 인 카르 복실 말단이다.다른 pH 값에서, 단백질의 아미노산은 이들의 전하가 다를 것이다.그들의 등전 지점 아래의 단백질은 양전하를 갖는다.대조적으로,이 시점 위의 것들은 음전하를 갖는다.

단백질 정제를위한 등전점에 대한 지식을 활용하기 위해, 단백질의 혼합물에 전기장이 적용된다.이것은 일반적으로 아가 로스 또는 폴리 아크릴 아미드 겔에서 수행되며 등전 초점으로 알려져 있습니다.오래된 기술은 양쪽 끝에 전극이있는 자당의 용액을 사용하여 유리 컬럼에서 더 큰 규모로 절차를 수행하는 것입니다.일관된 pH 구배의 형성을 유발하는 양서류라는 화합물이 첨가된다.겔 또는 컬럼이 전류에 노출 될 때, 단백질은 등전점에 도달 할 때까지 이동 한 다음 고정 상태를 유지한다.때때로, 효소가 연구되는 경우, 착색 반응을주는 기질을 사용할 수있다.일반적으로 기준이 알려진 등전 지점의 단백질을 갖는 표준이 사용됩니다.이어서, 단백질을 정제하고 시퀀싱 할 수있다.서열이 알려지면, 중합 효소 연쇄 반응 (PCR)을위한 프라이머를 설계하는 데 사용될 수 있으며 적합한 핵산 물질이 이용 가능한 경우 단백질의 유전자를 복제하는 데 사용될 수 있습니다.관련 단백질이 서로 다른지 확인합니다.한 가지 합병증은 단백질이 설탕에 결합 될 수 있다는 것입니다.이것을 글리코 실화라고하며 단백질의 PI에 영향을 줄 수 있습니다.다른 등전점을 가진 여러 단백질이있는 것처럼 보일 수 있습니다.크로마토 그래피와 같은 표준 방법에 의해 정제 된 단백질은 때때로 그들의 순도를 보장하기 위해 등전 초점에 의해 분석됩니다.