Wat is een ubiquitinatie -test?

Ubiquitinatie verwijst naar de binding van het eiwit ubiquitine aan andere eiwitten door drie verschillende enzymen.Een ubiquitinatie -test is een test die bepaalt hoeveel van dit proces plaatsvindt in de cel.Tests kunnen worden gebruikt om te bepalen hoe verschillende omstandigheden de eiwitbinding, stappen en structuren beïnvloeden die belangrijk zijn in de ubiquitinnatieroute en de hoeveelheid eiwit in de cel.Onvoldoende of overstabiele hoeveelheden zijn gekoppeld aan de ontwikkeling van veel verschillende ziekten.

Een eiwit gevonden in cellen, de functie van ubiquitine is om te binden aan eiwitten terwijl het functioneert als een tag of signaal naar andere structuren.Deze tag geeft vervolgens enzymen aan om te weten dat het eiwit kan worden vernietigd, gerecycled of verplaatst.Het resultaat is de vernietiging of transport van eiwitten.

Deze tagging -eiwitten zijn belangrijk voor DNA -herstel, virale infecties en immuunrespons.Andere belangrijke functies omvatten rollen in celdood, cellulaire deling en ontwikkeling van cellen.Te veel ubiquitine, of het ontbreken daarvan, kunnen een rol spelen bij de vorming van veel ziekten, zoals kanker, genetische aandoeningen en ziekten van het immuunsysteem.

Onderzoekers zullen een ubiquitinatie -test gebruiken om te proberen te bepalen welke omstandigheden de concentratie van het eiwit in de cel veranderen en zieke cellen met gezonde cellen vergelijken.Wetenschappers gebruiken het ook om te onderzoeken welke voorwaarden veranderingen in binding zullen veroorzaken.Bovendien kunnen ze proberen specifieke DNA -code te koppelen aan de hoeveelheid enzymen in de cel.

Er is meer dan één type ubiquitinatie -test die onderzoekswetenschappers specifiek gebruiken.Men zal het percentage eiwitten bepalen dat gebonden is aan ubiquintin.Een andere onderzoekt de activiteit van enzymen of de aanwezigheid van andere tussenproducten die in het alomtegenwoordige route worden gevonden.Verschillende testen worden ontwikkeld op basis van het doel -eiwit waaraan ubiquitine zal binden.

De basis van een ubiquitinatie -test is om een verbinding op te nemen die wordt gelabeld met behulp van een andere gemakkelijk gemeten chemische stof.In oncologische assays kan ubiquitine worden gelabeld met cryptaat, een verbinding die twee stikstofatomen bevat.Dit kan worden gebruikt om te bepalen welk enzym het meest actief is in de cel.

Een ubiquitinatie -test zal twee stappen hebben.De eerste is een enzymatische stap waarbij enzymen het gelabelde ubiquitine aan het doeleiwit binden.De tweede is een detectiestap waarin binding van het doel -eiwit wordt onderzocht met behulp van een conjugaat zoals een antilichaam.Het antilichaam zal fluoresceren of van kleur veranderen, waardoor de onderzoeker vervolgens de activiteit van de enzymen kan bepalen.