Skip to main content

Wat is ELISA -protocol?

Een enzym-gekoppelde immunosorbent-test (ELISA) is een veel voorkomende test die in immunologie wordt gebruikt om antigenen of antilichamen te detecteren.Antigenen veroorzaken een immuunsysteemreactie mdash;Met andere woorden, ze veroorzaken ziekten.ELISA wordt gebruikt om veel bacteriële en virale antigenen te detecteren, waaronder humaan immunodeficiëntievirus (HIV), malaria, cholera, mazelen en bof.Een iets ander ELISA -protocol kan worden gebruikt om antilichamen tegen deze en vele andere pathogenen te detecteren.Een ELISA-protocol is de stapsgewijze stappenprocedure voor het uitvoeren van een specifieke ELISA.

Hoewel het ELISA-protocol enigszins varieert, afhankelijk van het type ELISA dat wordt uitgevoerd, is het basisconcept voor allemaal hetzelfde.ELISA is afhankelijk van enzym-gekoppelde antilichamen, ook wel antiglobulines genoemd .Een signaalmolecuul bevestigd aan deze antiglobulinen veroorzaakt een substraat dat tijdens de test is toegevoegd om van kleur te veranderen, als het gewenste antigeen of antilichaam aanwezig is.De hoeveelheid aanwezige antigeen of antilichaam is evenredig met de hoeveelheid kleurverandering, die kan worden gemeten met een elektronische plaatlezer.

Er zijn drie hoofdtypen ELISA.Een Direct ELISA wordt meestal gebruikt om antigenen te detecteren in plaats van antilichamen.Dit is het eenvoudigste ELISA-protocol, omdat het enzym-gekoppelde antilichaam direct bindt aan het gewenste antigeen.Substraat wordt vervolgens toegevoegd om de aanwezige hoeveelheid antigeen te bepalen.

INDIRECT ELISA wordt gebruikt om antilichamen te detecteren, terwijl een ander type indirecte ELISA MDASH;genaamd een sandwich

Elisa mdash;kan worden gebruikt om antigenen te detecteren.Een sandwich ELISA -protocol vereist twee antilichamen, de Capture and Detection -antilichamen genoemd, om te binden aan het gewenste antigeen.Een antiglobuline wordt toegevoegd, dat bindt aan het detectie -antilichaam en het substraat wordt toegevoegd.De indirecte ELISA volgt een soortgelijk protocol, maar gebruikt een vangant -antigeen in plaats van een vangstantilichaam om het gewenste antilichaam te detecteren. Competitieve ELISA wordt vaak gebruikt voor het detecteren van antigenen die aanwezig zijn in lage concentraties, omdat het een zeer een zeer is een zeer een zeer een zeer een zeer een zeer een zeer een zeer een zeer een zeer een zeer een zeer een zeer een zeer een zeer een zeer een zeer een zeer een zeer in lage concentraties.Gevoelige test.In tegenstelling tot de andere ELISA-protocollen gebruikt competitieve ELISA een enzym-gekoppeld antigeen in plaats van een antilichaam en een iets andere kwantificatiemethode.Daarin worden het monster dat het te detecteren antigeen bevat en het enzym-gekoppelde antigeen beide aan een antilichaam toegevoegd en de twee antigenen strijden om antilichaambindende plaatsen.Wanneer het substraat wordt toegevoegd, is de kleurverandering groter, met een hogere verhouding van gebonden enzym-gekoppelde antigenen tot gebonden monsterantigenen.Dit betekent dat een hogere kleurverandering wordt gedetecteerd bij lagere concentraties van het monsterantigeen, wat deze methode zo gevoelig maakt.