Wat is een genbibliotheek?

Een genbibliotheek is de term voor collecties van deoxyribonucleïnezuur (DNA) -fragmenten die willekeurig zijn gekloond uit de genomen van organismen.Ze worden gekloond als plasmiden die afzonderlijk van hun chromosomen en fagen kunnen repliceren, een parasitair virus dat zich voedt met bacteriën.Wanneer gekloneerd als plasmiden is de verzameling van gastheercellen en bevat elk van de cellen een DNA -fragment.Faaggenbibliotheken bestaan uit wat faaglysaten worden genoemd, die residuen zijn van vernietigde cellen met een ingebrachte DNA -fragment.Wanneer genbibliotheken een verzameling van alle genetische informatie over een organisme bevatten, worden ze beschouwd als een representatie -genbibliotheek.

Bovendien kunnen bibliotheken cellulair recombinant nucleïnezuur (RNA) gebruiken voor hielmateriaal, en deze verzameling gastheercellen metDe recombinante vectoren staan bekend als een CRNA -genbibliotheek.Screening van genbibliotheek vindt bepaalde cellen die kloneringvectoren bevatten met een bepaald gen dat wordt gezocht in een genbibliotheek en gebruikt vervolgens een van de vele technieken van het isoleren en oogsten van deze.Eenmaal geoogst, worden de cellen als gekloond beschouwd.Om een redelijke kans te hebben op het isoleren en klonen van een bepaald gen, worden meestal alleen representatieve genbibliotheken gebruikt als elk gen en elk origineel DNA -fragment van een bepaald genoom worden daarin verzameld.Om een kans van 99% te bereiken om een bepaald menselijk gen te vinden voor klonen, moeten meer dan 600.000 gekloonde cellen worden gescreend om het gewenste gen uit een representatieve genbibliotheek te vinden..De bibliotheek is gestructureerd om het DNA en de duizenden verschillende genen te organiseren.De bibliotheek wordt een verzameling tienduizenden bacteriekolonies, elk gemoduleerd met een fragment van DNA uit het organisme dat een gen van speciale interesse bevat.Bibliotheken bevatten ook restrictie -enzymen en een plasmide.De restrictie -enzymen worden gebruikt om de nucleotide -informatie van het DNA te lezen en worden gebruikt om het DNA in fragmenten te snijden door de nucleotiden van elkaar te scheiden.

Dezelfde beperkingsenzymen snijden de bacteriële plasmiden en de fragmenten en plasmiden worden gecombineerd in een testbuis om te combineren, waardoor een nieuwe combinatie wordt gemaakt.Deze recombinante plasmiden worden vervolgens teruggebracht naar de bacteriekweek met behulp van hitteschok of elektroporatie.Deze stappen worden steeds opnieuw uitgevoerd totdat een hele genbibliotheek is gevormd voor een bepaald genoomorganisme uit alle fragmenten van de oorspronkelijke DNA -extractie.