Wat is een antilichaamconjugaat?

Een antilichaamconjugaat is een tagging -molecuul dat kan worden gebruikt in histologische of enzymatische antigeendetectietesten om gebonden antilichamen te lokaliseren.Het functioneert door fysiek bevestigd of geconjugeerd te zijn aan het antilichaam dat wordt gebruikt om een interessante antigeen te taggen.Een antilichaam dat wordt getagd tegen een antilichaamconjugaat is een hulpmiddel dat vaak wordt gebruikt in onderzoek om de exacte locatie of de hoeveelheid eiwitten of interessante antigenen te identificeren, waartegen het antilichaam of antilichamen werden verhoogd.

Histologische en proteomische testen zijn vaak afhankelijk vanAntilichamen als reagens in onderzoekstechnieken waarmee specifieke eiwitten kunnen worden gelabeld.Door een antigeen of eiwit van belang bloot te stellen aan een antilichaam dat ertegen is verhoogd, kunnen antigenen of eiwitten worden getagd.Door een antilichaamconjugaat mdash;dat wil zeggen, een antilichaam dat is geconjugeerd met een molecuul dat specifiek wordt gebruikt of gesynthetiseerd om gemakkelijk te worden gedetecteerd mdash;Antilichamen op hun respectieve antigenen kunnen vervolgens worden geïdentificeerd en getest.Het meest voorkomende type antilichaamconjugaat is een fluorescerend molecuul, waardoor antigenen in weefsel onder een fluorescerende microscoop kunnen worden geïdentificeerd.Andere conjugaten omvatten moleculen zoals paardenradijsperoxidase, die wordt gebruikt in conjugatie met antilichamen voor latere ontwikkeling met diaminobenzidine (DAB).

Vaak primaire antilichamen zullen worden verhoogd tegen specifieke antigenen, terwijl secundaire antilichamen worden geconjugeerd tegen het taggen van molecules en rais tegen de molecules en tegen het taggenprimair antilichaam.Als voorbeeld zou men geïnteresseerd kunnen zijn in het identificeren van een antigeen genaamd Antigen X. Men zou dan bijvoorbeeld een antilichaam gebruiken dat is opgeheven in een muis die reageert en vasthoudt aan antigeen X. Om te kunnen vinden waar deze primaire muis antilichamen hebben gevondenen gebonden aan deze antigeen X -moleculen, zou dan een secundair antilichaam worden gebruikt mdash;Bijvoorbeeld, een opgeheven in een geit mdash;Dat zou worden getagd met een conjugaat dat dit secundaire antilichaam detecteerbaar maakt in enzymatische of fluorescerende microscopische testen.Voor assays bij het lokaliseren van antigenen met behulp van een elektronenmicroscoop worden gouddeeltjes vaak gebruikt als een antilichaamconjugaat omdat ze kunnen worden gedetecteerd met behulp van een elektronenstraal.

De reden voor het gebruik van primaire en secundaire antilichamen, in plaats van een antilichaamconjugatie te gebruiken waarin de primaire conjugatieAntilichaam is direct geconjugeerd, is kosteneffectiviteit.Antilichaamconjugatie is duur in termen van tijd en reagentia.Vooral voor ongewone antigenen is antilichaamconjugatie op primaire antilichamen niet de kosten van productie waard.Door het gebruik van antilichaamconjugatie op secundaire antilichamen kan grote hoeveelheden van een geconjugeerd antilichaam tegelijk worden gesynthetiseerd en in assays worden gebruikt met een reeks primaire antilichamen die zijn aangepast om veel verschillende antigenen te lokaliseren, waardoor het productieproces de moeite waard en kosteneffectief is.

In sommige gevallen zal een primair antilichaam echter worden getagd om de ruis in het detectiesignaal te verminderen vanwege de verhoogde niet-specifieke antilichaambinding die het gevolg is van het gebruik van meerdere antilichamen.Hoewel deze dure, zeer gevoelige testen deze methode nog steeds vragen.Het is mogelijk om kits te kopen waarmee een onderzoeker conjugaten kan taggen tegen zijn eigen keuzeantilichaam, de kosten van het reagens verhogen, maar de protocolstappen verlaagt en mogelijk de signaal-ruisverhouding in de uiteindelijke antilichaamdetectie-test verhoogt.