Wat is een endonuclease?
Een endonuclease is een gespecialiseerd enzym dat in staat is om de bindingen tussen nucleïnezuren in een polynucleotideketen te verbreken, wat twee fragmenten oplevert. Deze enzymen kunnen zowel in DNA als RNA werken om vanuit een streng te snijden. Bepaalde endonucleasen, bekend als restrictie -endonucleasen, vallen specifieke locaties aan in strengen van RNA en DNA en herkennen bepaalde sequenties. Deze enzymen zijn zeer waardevol in wetenschappelijk onderzoek wanneer mensen het vermogen willen om genetische informatie te bewerken, zoals in genetische manipulatie.
daarentegen kan een exonuclease alleen genetisch materiaal wegsnijden aan het einde van een streng DNA of RNA. Endonucleasen worden gebruikt door bacteriën en archaea als onderdeel van hun defensieve mechanismen. Enkele van de vroegste observaties van deze enzymen in actie komen uit onderzoek naar bacteriën en bacteriën worden gebruikt om endonucleasen op grote schaal te produceren voor onderzoeksdoeleinden.
binnen een bacterie is een endonuclease ontworpen om virale aanvallen af te weren door de buitenlandse DNA te hakkenwordt niet -functioneel. Het organisme beschermt zijn eigen DNA tegen de acties van het endonuclease door een proces dat bekend staat als methylering. Methylering voorkomt dat het endonuclease werkt, waardoor het DNA van het organisme intact blijft. Buitenlands DNA heeft echter niet zoveel geluk en de endonuclease zal de ruggengraat van het DNA op twee plaatsen netjes knipten, waardoor het afzonderlijke strengen wordt verbroken. Afhankelijk van het endonuclease, kunnen de gebeurtenissen "bot" of "plakkerig" zijn, verwijzend naar waar in de streng het DNA of RNA wordt afgehakt.
Onderzoekers kunnen bekende restrictie -endonucleasen gebruiken om DNA in de gewenste doelgebieden te knippen, waardoor een handig invoegpunt ontstaat. Nieuw genetisch materiaal kan op dit punt worden ingevoegd, met als doel de expressie van een geheel nieuw gen te overhalen. Dit kan worden gebruikt om dingen te doen zoals het introduceren van herbicidebestendigheid tegen gewassen, zodat boeren velden kunnen spuiten om Dow te houdenn onkruid.
Labs die endonucleasen produceren, verkopen hun producten aan onderzoekers en andere laboratoria. Het lab beschrijft de manieren waarop een product kan handelen, waardoor onderzoekers kunnen bepalen welk product het meest geschikt zou zijn voor hun gewenste gebruik. Werken met endonucleasen kan lastig zijn en het vereist geduld en vaardigheden. Je zou een enzym als een beperking endonuclease kunnen beschouwen als een zeer kleine en zeer kieskeurige set schaar die kan worden gebruikt om een project te maken, maar ook kunnen mislukken als ze niet goed worden behandeld, op de verkeerde plek snijden of helemaal niet snijden.