Skip to main content

Wat is het polymorfisme van de beperking fragmentlengte?

Een beperkingsfragmentlengte polymorfisme, of RFLP, is een variatie in homologe DNA -sequenties.Polymorfismen zijn de variaties in homoloog DNA die optreden tussen individuen, terwijl de term beperking verwijst naar het feit dat kleine secties DNA uit een groot stuk kunnen worden gesneden met behulp van restrictie -enzymen.Sommige DNA -secties hebben meer variabiliteit dan andere, en secties met een hoge mate van variabiliteit zijn nuttig in restrictiefragmentlengte polymorfisme -analyse.

Beperkingsfragmentlengte polymorfisme is afhankelijk van de activiteit van restrictie -endonucleasen.Deze klasse enzym wordt gevonden in veel bacteriesoorten.In een bacterie is de rol van beperking endonucleasen om bescherming te bieden tegen buitenlands DNA dat toegang krijgt, door het in stukken te breken.In moleculair onderzoek kunnen restrictie -enzymen worden gebruikt om DNA op bekende variabiliteitsplaatsen te fragmenteren, zodat de resulterende fragmenten kunnen worden geanalyseerd.

Elk type enzym herkent een specifieke DNA -basispaarsequentie en werkt op elk punt om het DNA -molecuul op elk punt te splitsenwaar het de volgorde herkent.Bacteriën beschermen hun eigen DNA tegen gebroken met een onderscheidend patroon van DNA -methylatie dat voorkomt dat endonucleasen van beperkingen van binding.Meer dan 800 verschillende restrictie -endonucleasen zijn ontdekt, die samen meer dan 100 unieke nucleotidesequenties herkennen.De enzymen worden gebruikt om DNA -lengtes bij bepaalde sequenties te snijden, zodat de verschillen tussen individuen kunnen worden onderzocht.Oplossingen van gefragmenteerd DNA, gesneden bij bepaalde bekende nucleotidesequenties, worden gehybridiseerd met sondes die zijn ontworpen om vooraf gedefinieerde DNA-sequenties te detecteren.De monsters worden vervolgens geanalyseerd met behulp van gelelektroforese.Deze techniek produceert een gel met meerdere banden van donkere kleuring, die elk een ander DNA -fragment vertegenwoordigen.Door het patroon van kleuring te onderzoeken, kunnen wetenschappers het patroon van RFLP's in een monster bepalen.

Polymorfismen komen op grote schaal voor in het hele menselijke genoom, en de analyse hiervan heeft bewezen dat verschillende groepen mensen de neiging hebben om RFLP's gemeen te delen.Bepaalde RFLP -typen zijn gebruikelijk voor mensen van verschillende etnische groepen of geografische oorsprong, bijvoorbeeld, en koppeling bestaat ook binnen familiale groepen.Deze variatie bestaat in het hele dierenrijk, waardoor het een nuttig onderzoekstool is, niet alleen voor het traceren van menselijke afkomst, maar ook voor het bestuderen van migratie en evolutie van dieren in het wild.

Analyse van de beheersfragmentlengte polymorfismen kan nuttige informatie bieden voor klinische en medische doeleinden.Beperkingsfragmentlengte polymorfisme -sondes worden gebruikt in vaderschapstests, bij de diagnose van erfelijke ziekten, bij forensische wetenschap en in genotypering.Het analyseren van patronen van RFLP's in een heel genoom is de basis van DNA -vingerafdrukken, de techniek die de onderbouwing is van al deze verschillende toepassingen.