Hva er formålet med fjerning av endotoksin?

Endotoksin er en vanlig forurensning av medisinske produkter som stammer fra bakterier.Tilstedeværelsen av endotoksin kan komme fra iboende komponenter i produksjonsprosessen eller fra utilsiktet forurensning av produktet.Endotoksin kan forårsake endotoksisk mdash;eller septik mdash;Sjokk, vevsskade og til og med død.Endotoksinfjerning før godkjenning av medikamentet for frigjøring er derfor nødvendig for å unngå sykdom hos mottakeren av et medikament.

Endotoksinforurensning oppstår når en viss gruppe bakterier, kalt gram negative bakterier, er til stede, eller har vært til stede, i denproduksjonsprosess.Med bakterier som vanligvis deles i to grupper, gramnegative og gram -positive, er gramnegative bakterier ekstremt vanlige.Gram -negativ betegnelse stammer fra bakterienes utseende etter en spesifikk fargingsprosess, kalt en gram flekk, er blitt utført.Endotoksin er til stede i alle gram -negative bakterier, uavhengig av om de forårsaker sykdom.

Den ytre delen av en gram negativ bakterie inneholder lipopolysakkarider (LPS) som brukes til strukturell stabilitet.Endotoksin refererer til denne LPS -delen av bakterien.For eksempel inneholder en E. coli -celle omtrent 2 millioner LPS -molekyler.LPS er ikke bare til stede i cellene med levende eller døde bakterier, men frigjøres også kontinuerlig i miljøet.Frigjøringen skjer under vekst og inndeling av bakterien, og når cellen dør.

LPS -molekylet har en indirekte skadelig effekt på kroppen.Endotoksinet interagerer med immunsystemet gjennom binding med celler i blodet som kalles makrofager og monocytter.Denne bindingen forårsaker en inflammatorisk respons ved å frigjøre faktorer som interleukin-6, interleukin-1 og tumor nekrose faktor.Denne inflammatoriske responsen fører til feber og noen ganger endotoksisk sjokk og død.

Disse farlige effektene oppstår enten med en enkelt høy dose endotoksin eller med gjentatte lavere eksponeringsnivåer.En dose på 1 nanogram LPS per milliliter produkt kan påkalle en endotoksisk reaksjon hos pattedyr når produktet blir injisert intravenøst.Personer med sykdommer som AIDS, leukemi eller diabetes er spesielt utsatt for endotoksisk sjokk.

Genetisk konstruerte gramnegative bakterier brukes regelmessig i produksjonen av biologisk aktive proteiner og peptider.Tilstedeværelsen av LPS -molekylene i både produserende celler og den omkringliggende kulturen betyr at produktet krever rensing og endotoksinfjerning.Lipopolysakkarid er et veldig stabilt molekyl sammenlignet med proteiner, som motstår ekstrem pH og temperaturer, så endotoksinfjerning nødvendiggjør kompleks fjerningsteknikker.Produsenter bruker derfor metoder som ionebytterkromatografi, ultrafiltrering og membranbasert kromatografi for endotoksinfjerning eller reduksjon til et akseptabelt nivå.