Hva er plasmider?

Innenfor mange forskjellige bakterier kan små sirkulære DNA -stykker finnes i cytoplasma.Disse DNA -sirklene er kjent som plasmider, og de er atskilt fra det kromosomale DNA, eller DNA som bærer genene for bakteriecellene.Flere kopier av plasmidene er ofte til stede når som helst i bakteriecellen.Plasmider spiller en veldig viktig rolle i genteknologi, spesielt i genkloning.

Når gener klones, foregår prosessen vanligvis i bakterier.For å få genet som skal klones inn i bakteriene, er en vektor nødvendig.Et plasmid er det som brukes som vektoren, da det lett kan passere fra en celle til en annen.

Det er en rekke trinn involvert i genkloning før du setter inn et plasmid i en vertscelle.For det første må genet som skal kopieres isoleres, og det må også plasmidene som skal brukes som vektorer.Når dette er gjort, må genet settes inn i plasmid -DNA.Plasmidet settes deretter inn i bakterievertcellen for replikasjon.

For å isolere plasmider fra bakterieceller, må cellene opprinnelig behandles med enzymer for å bryte ned celleveggene i bakteriene.Det større kromosomale DNA er de adskilt fra de mindre plasmidene ved bruk av en sentrifuge.Det isolerte plasmid-DNA er nå klart til å få genet satt inn i det.

Plasmider består av en dobbeltstrenget sirkel av DNA.For å sette inn ønsket gen, kuttes plasmid -DNA med begrensningsenzymer.Disse enzymene kuttet bare DNA ved veldig spesifikke nukleotidsekvenser.Når plasmid -DNA er kuttet, tilsettes linkersekvenser til de løse ender som korrelerer med endene av genet som skal settes inn.Dette sikrer at genet passer nøyaktig inn i plasmidet.

Når genet er satt inn i plasmidet, er det nå klar til å settes inn i en levende bakterie.Bakterier gjenskaper plasmidene sine slik at en enkelt celle kan inneholde mange kopier.Det kan være opptil 200 kopier av et enkelt plasmid i en bakterie.Hvis plasmidet blir introdusert i mange bakterieceller, kan mange kopier av genet produseres relativt raskt, spesielt når bakterieceller replikerer omtrent hvert 20. minutt.

Dette er prosessen som brukes til å skape humant insulin.Genoding for insulin ble isolert og satt inn i et plasmid.Alle plasmidene som inneholdt insulingen ble deretter introdusert i en bakterie, hvor de ble replikert.Bakteriene fortsatte deretter å gjenskape seg selv, slik at mange millioner celler som inneholder insulingen -genet kan opprettes på veldig kort tid.Dette klonede genet gir nå en pålitelig kilde for humant insulin.