Jakie są kroki w procedurze ELISA?

Procedura ELISA rozpoczyna się w klinice, a próbka krwi została pobrana od pacjenta.Następnie stosuje się szereg kroków przy użyciu zestawu testowego ELISA w laboratorium.Test wykryje obecność przeciwciał lub antygenów w chorobie, takiej jak HIV, we krwi.Kroki obejmują dodanie różnych substancji i mycie, a wyniki są ogólnie mierzone przez zmianę koloru.

Test immunosorbencyjny związany z enzymem (ELISA), który jest również określany jako test immunologiczny enzymu (EIA), jest wykorzystywany jako test diagnostyczny.Jest najbardziej znany jako test diagnostyczny dla HIV.Płyta testowa zwykle składa się z 96 małych studni, do których unieruchomiony jest określony antygen.Jeśli przeciwciało jest obecne w próbce surowicy, wiąże się ono z antygenem, umożliwiając wykrycie za pomocą różnych etapów procedury ELISA.

Pierwszym krokiem w procedurze ELISA jest uzyskanie próbki od pacjenta.Odbywa się to pielęgniarka w sterylnych warunkach.Krew jest zwykle pobierana z żyły w ramieniu lub ręce.Na ramię umieszcza się opaska uciskowa, aby puchnąć żyłę i ułatwić zabieg, a skóra jest czyszczona tam, gdzie igła zostanie włożona.Mały kutas może być odczuwalny, gdy igła wchodzi, a krew zostanie zebrana w sterylnej rurce.

Po pobraniu próbki krwi przeniesiono go do laboratorium, gdzie reszta procedury ELISA będzie wykonywana przez laboratoriumtechnik.Próbkę krwi najpierw dodaje się do studni płytki ELISA.Jeśli występuje specyficzne przeciwciało, wiąże się ono z antygenem.Następnie płytka jest mywającą za pomocą bufora, aby usunąć niezwiązane przeciwciała.

Następnie dodaje się drugie przeciwciało, zwykle pochodzenia zwierzęcego, które ma enzym, który jest do niego dołączony, który wiąże się z kompleksem przeciwciała-antygenu.Płyta jest ponownie myta, aby usunąć nadmiar.Enzym jest reaktywny kolor, gdy pod koniec procedury ELISA jest dodawany podłoże.Jest to pomiar stopnia zmiany koloru, który daje wynik.

Procedura ELISA należy dokładnie przestrzegać, aby uniknąć fałszywych wyników.W większości płyt ELISA uwzględniono kontrolę dodatnią i negatywną, aby zminimalizować takie fałszywe wyniki.Podczas testowania na HIV zwykle następuje wynik dodatni przez drugi, potwierdzający, test, często innego typu, takiego jak Western blot.