Co to jest przeciwciało biotyny?

W przeciwieństwie do tego, co można by pomyśleć, przeciwciało biotyny nie jest substancją, która jest podniesiona przeciwko biotynie.Przeciwciało biotyny jest raczej przeciwciałem, które zostało skoniugowane z biotyną .Biotyna silnie wiąże się z ligandem mdash;Avidin mdash;które z kolei można skoniugować z cząsteczkami wykrywalnymi światłem, takimi jak fluorofory.Biotyna i awidyna stanowią jedno z najsilniejszych biologicznie istotnych kowalencyjnych wiązań, co sprawia, że jednostki ligand/receptor skoniugowane z biotyną i awidyną są szczególnie przydatne w badaniach naukowych.

Biotyna jest witaminą B-kompleksową i mdash;Witamina B7.Jest to taka mała cząsteczka, że wiele cząsteczek biotyny można sprzężone z pojedynczym przeciwciałem monoklonalnym lub poliklonalnym.Fakt, że biotyna jest również rozpuszczalna w wodzie, pozwala na większą wszechstronność w systemach buforowych niż gdyby była nierozpuszczalna.W przypadku większej swoistości koniugacja przeciwciała monoklonalnego z biotyną jest często zalecana przez koniugację przeciwciała poliklonalnego.Cząsteczka biotyny może być bezpośrednio związana z interesującym przeciwciałem lub można ją połączyć przez ogon molekularny, aby umożliwić większą swobodę ruchu.

Avidin ligand biotyny znajduje się w albuminie jaja.Można go tanio wykonać i łatwo odizolować.Wiele cząsteczek awidyny wiąże się z każdym receptorem biotyny, wzmacniając jednocześnie sygnał wykrywania pojedynczego przeciwciał.Gdy przeciwciało biotyny przylega do interesującego antygenu, eksperymentator może następnie wystawiać kompleks na VIDIN skoniugowane z fluoroforami, co czyni kompleks wykrywalnym.Poprzez obrazowanie fluorescencyjne przeciwciało biotyny i ligand skoniugowany awidyna można wykryć za pomocą mikroskopii świetlnej, a interesujące antygeny można zbadać in situ .Wspólne rozwiązanie do wykrywania antygenu istnieje alternatywy, które nadal korzystają z kompleksu biotyny/awidyny.Wiązanie biotyny z ligandem takim jak neurotoksyna może być korzystne w wykrywaniu umieszczenia receptorów neuronalnych dotkniętych danej neurotoksyny.Możliwe jest również sprzężenie biotyny z sekwencją nukleotydową, taką jak przekaźnik kwas rybonukleinowy (mRNA) w celu znalezienia, gdzie te sekwencje nukleotydowe są tłumaczone na białka lub wykryć regulację mRNA komórkową.

Możliwe jest zakup biotynylowanych przeciwciał poliklonalnych lub monoklonalnych, przeciwciała monoklonalnych,Chociaż produkcja biotynylowana przeciwciał ma zdolność wielu eksperymentatorów.Protokoły można znaleźć online sugerujące metody biotynylacji przeciwciał, choć najłatwiej przestrzegać protokołów bezpośrednio łączą biotynę z przeciwciałem, zamiast sugerować, jak interkalować przekładkę molekularną.Molekularne przekładki między biotyną a związanym z nią przeciwciałem pozwalają na większe odstępy, aby narażać więcej cząsteczek na miejsca wiązania, a te przeciwciała biotyny są zwykle kupowane, a nie wykonane.