Co to jest ELISA w surowicy?

Test immunosorbentowy związany z enzymem w surowicy (surowica ELISA) jest metodą stosowaną do określenia ilości substancji biologicznej w próbce surowicy poprzez opieranie się na specyficznej interakcji między antygenem a przeciwciałem.Przykłady interesujących substancji biologicznych obejmują przeciwciało wytwarzane w odpowiedzi na infekcję wirusową, takie jak przeciwciało przeciwko ludzkiemu wirusowi niedoboru odporności (HIV) lub hormonowi wskazującego ciążę, taką jak ludzka gonadotropina naczyniowa choryonowa (HCG) lub na autoimmunologicznąPrzeciwciało wytwarzane w reumatoidalnym zapaleniu stawów, takim jak czynnik reumatoidalny.Zasadniczo istnieje test bezpośredni, który wykorzystuje określone przeciwciało do wykrycia obecności antygenu w próbce surowicy, oraz test pośredni, który wykorzystuje antygen do określenia obecności przeciwciał w próbce surowicy.

w bezpośrednimSurowica ELISA, próbka zawierająca nieznaną ilość antygenu jest przymocowana do nieruchomej powierzchni, takiej jak rurka reakcyjna lub płyta mikrotiterowa, i inkubowana jest ze specyficznym przeciwciałem, które jest chemicznie połączone z enzymem.I odwrotnie, w pośredniej surowicy ELISA znany antygen jest przymocowany do nieruchomej powierzchni, a następnie inkubowany z próbką surowicy, która zawiera nieznaną ilość przeciwciała.Oczekuje się, że przeciwciało specyficzne dla antygenu w próbce surowicy będzie ściśle wiązać się z unieruchomionym antygenem, podczas gdy nie niespecyficzne przeciwciała są usuwane w poniższych etapach mycia.Zasadniczo powierzchnia nieruchomości jest leczona drugim przeciwciałem, które rozpoznaje niezmienny obszar wszystkich przeciwciał i który jest chemicznie powiązany z enzymem.Zarówno w bezpośrednim, jak i pośredniej ELISA, ostatni krok polega na dodaniu substratu specyficznego dla enzymu, inicjując reakcję, która wytwarza wymierny sygnał, który jest bezpośrednio proporcjonalny do ilości antygenu lub przeciwciała obecnego w próbce surowicy.

surowicy surowicyELISA jest powszechnie stosowanym testem z kilku powodów.Co najważniejsze, uważa się go za niezawodny test kliniczny ze względu na swoistość interakcji antygen-przeciwciało, a czułość tego testu pozwala na wykrycie substancji biologicznych w bardzo niskich stężeniach w surowicy.Jest zaprojektowany do oceny dużej liczby próbek jednocześnie, a zatem jest często stosowany w operacjach na dużą skalę, takich jak badanie próbek dawcy krwi w celu obecności przeciwciał HIV.Ponadto zestawy ELISA, które mierzą powszechnie badane przeciwciała i antygeny, są dostępne w handlu do stosowania w warunkach klinicznych lub badawczych i wygodnie zawierają wszystkie niezbędne odczynniki do przeprowadzenia pełnego eksperymentu.

Rosnące obszar badań obejmuje zastosowanie technologii ELISA w surowicy ELISAw obszarze wykrywania cytokin.Cytokiny są rozpuszczalnymi cząsteczkami białka wydzielonymi przez układ odpornościowy, które często są zaangażowane w procesy zapalne;Poziomy cytokin są zatem pouczające dotyczące stanów chorobowych związanych z przewlekłym stanem zapalnym, takim jak choroby serca, choroby autoimmunologiczne i choroby trawienne.Uważa się, że ocena poziomów cytokin może być w stanie rozróżnić choroby zapalne jelit, takie jak choroba Crohna i wrzodziejące zapalenie jelita grubego, i może ostatecznie być w stanie przewidzieć wynik choroby serca i reumatoidalnego zapalenia stawów.