Co to jest testy pirogenowe?

Testy pirogenowe definiuje proces stosowany przez producentów leków w celu ustalenia, czy toksyny bakteryjne są obecne w szczepionkach i lekach, które mogą powodować gorączkę, gdy są stosowane u ludzi.Określa, czy drobnoustroje lub ich metabolity są obecne w roztworach dożylnych podczas procesu produkcyjnego.Najczęstszą i najstarszą formą testowania pirogenowego polega na wstrzykiwaniu leków do królików w celu ustalenia, czy rozwija się gorączka.Nowszy test wykorzystuje krew z kraba podkowego do testowania toksyn.

Metoda testowania pirogenów królika pojawiła się w latach 40. XX wieku po tym, jak niektórzy pacjenci zachorowali na leki dożylne.Urządzenia podskórne w tym czasie okazały się przydatne do podawania leków bezpośrednio do krwioobiegu u pacjentów, którzy nie byli w stanie tolerować leków doustnych.Mimo że urządzenia hipodermiczne były sterylne, leki nie zawsze były bezpieczne.

Pacjenci czasami rozwijali wysokie gorączki, dreszcze i bóle ciała, a niektórzy ludzie doznali wstrząsu.Lekarze nie wiedzieli, dlaczego tak się zdarzyło, często nazywając warunek gorączki wtrysku, gorączką soli fizjologicznej lub gorączką wody destylowanej.Naukowcy później odkryli, że niektóre leki i szczepionki zostały zanieczyszczone w laboratoriach produkcyjnych endotoksyn pirogenu, silne bakterie wytrzymujące sterylizację.

Ciało ludzkie walczy z narażeniem na toksyny bakteryjne w środowisku przez skórę.Gdy zanieczyszczone leki są wstrzykiwane do krwioobiegu, toksyny omija normalne mechanizmy obronne.Białe krwinki zaczynają uwalniać inną formę pirogenu, która powoduje wysoką gorączkę, co może prowadzić do szoku i śmierci.

Testy pirogenowe w laboratoriach leków obejmuje sprzęt grzewczy używany do zapewnienia sterylizacji.Lek jest wstrzykiwany do żył ucha królików, aby sprawdzić, czy rozwija się gorączka.Temperatury odbytnicy zwierząt testowych są analizowane po 30 minutach i ponownie od jednej do trzech godzin później.Jeśli zwierzęta pozostają wolne od gorączki, rozwiązanie jest wolne od toksyn.

Proces testowania pirogenu na zwierząt zwykle obejmuje wstrzykiwanie kilku królików na raz w 10-minutowych ramach czasowych.Dawkowanie dla każdego królika zależy od masy ciała, wieku i płci.Ta sama grupa królików może być testowana wielokrotnie co kilka dni, aż do rozwinięcia tolerancji na leki.

Nowsza technika testowania pirogenów nazywa się testem lizatu amebocytów Limulus (LAL).Krew z krabów podkowy zawiera wysoki poziom toksyn naturalnie występujących w życiu morskim.Naukowcy odkryli sposób na wykorzystanie krwi do testowania toksyny bakteryjnej w lekach i surowca stosowanych do produkcji medycyny.Procedura testowania pirogenów LAL może być 100 razy bardziej wrażliwa niż metody testowania królika.Urządzenia medyczne, które są wszczepione na ludzi, przechodzą testy LAL, wraz z lekami radioaktywnymi i znieczuleniem.