Co to jest Western blot?

Western blot to technika analizy laboratoryjnej, która służy do izolowania białek.Może być stosowany w diagnozie niektórych chorób, a także w badaniach różnych białek i procesów.Słynnie, Western blot jest powiązany z rozpoznaniem zakażenia HIV, ale można go również wykorzystać do poszukiwania śladów bydlęcej gąbczastego zapalenia mózgu (BSE) i boreliozy.Próbki wysłane do testowania z protokołem Western blot mogą zwrócić wyniki w ciągu kilku dni do kilku tygodni, w zależności od pojemności laboratoryjnej i pilności.

W Western blot próbka, która może pochodzić z krwi lub tkanki, jest pierwsza, jest pierwszaPrzełożył elektroforeza, aby białka oddzieliły się według długości.Pasek żelu elektroforezy z izolowanymi białkami o długości docelowej można zastosować do przeniesienia białek do substratu nitrocelulozy na następny etap testu.Na tym etapie do próbki wprowadza się przeciwciało, w którym celem oznaczania białek antygenami, na które zamyka przeciwciało.

Po oznakowaniu białek można je łatwo zidentyfikować.W przypadku testowania choroby obecność białka reaktywnego wskazuje, że próbka była pozytywna.Western blot rzadko zwracają fałszywe pozytywne pozycje, chociaż może się to zdarzyć, a mogą również zwrócić fałszywe negatywy, w których dana osoba faktycznie ma chorobę, ale nie pokazuje testów Western blot.Może to być szczególnie powszechne w przypadkach, w których czynnik powodujący chorobę nie zaczął jeszcze powtórzyć. Badacze mogą wykorzystać wyniki do identyfikacji określonych białek, które śledzą, i dla różnych innych celów.Zrozumienie, w jaki sposób funkcje protokołu Western blot jest ważną umiejętnością dla niektórych badaczy i techników laboratoryjnych, ponieważ muszą być w stanie zwrócić wiarygodne i niezawodne wyniki przy użyciu tej metody.Umiejętności laboratoryjne, w tym uczenie się, jak radzić sobie skomplikowane lub złe próbki, oraz jak uniknąć zanieczyszczenia podczas procesu, aby wyniki testu były prawdziwe.

Ta technika jest czasami znana jako immunoblot, ponieważ zasadniczo pożądane białka są„Bliste” przeciwciałami, aby się pojawiły.Ten test można wykorzystać do poszukiwania białek u wszystkich zwierząt, nie tylko ludzi, z weterynacjami często korzystającymi z testu Western blot w celu ustalenia, czy stado krów zostało zarażone, czy narażone na BSE.