O que é o polimorfismo de comprimento de fragmento de restrição?

Um polimorfismo de comprimento de fragmento de restrição, ou RFLP, é uma variação nas sequências de DNA homólogas. Os polimorfismos são as variações no DNA homólogo que ocorrem entre indivíduos, enquanto o termo restrição refere -se ao fato de que pequenas seções de DNA podem ser cortadas de uma peça grande usando enzimas de restrição. Algumas seções de DNA têm mais variabilidade do que outras, e seções com um alto grau de variabilidade são úteis na análise do polimorfismo de comprimento do fragmento de restrição. Esta classe de enzima é encontrada em muitas espécies bacterianas. Em uma bactéria, o papel das endonucleases de restrição é fornecer proteção contra o DNA estrangeiro que ganha acesso, dividindo -o em pedaços. Na pesquisa molecular, as enzimas de restrição podem ser usadas para fragmentar o DNA em locais conhecidos de variabilidade, para que os fragmentos resultantes possam ser analisados.

Cada tipo de enzima reconhece um PAI de base de DNA específicose sequência r, e atua para clicar a molécula de DNA em qualquer ponto em que reconheça a sequência. As bactérias protegem seu próprio DNA de serem quebradas com um padrão distinto de metilação do DNA que impede a ligação à endonucleases de restrição. Mais de 800 endonucleases de restrição diferentes foram descobertas, que juntas reconhecem mais de 100 sequências de nucleotídeos únicas. A maioria das seqüências reconhecidas tem entre quatro e seis pares de bases de comprimento.

As enzimas de restrição são usadas na biotecnologia para analisar o polimorfismo do comprimento do fragmento de restrição por várias razões. As enzimas são usadas para cortar comprimentos de DNA em determinadas seqüências, para que as diferenças entre os indivíduos possam ser examinadas. As soluções de DNA fragmentado, cortadas em certas seqüências de nucleotídeos conhecidas, são hibridadas com sondas projetadas para detectar sequências de DNA predefinidas. As amostras são então analisadas usando eletroforese em gel.Essa técnica produz um gel com várias faixas de coloração escura, cada uma das quais representa um fragmento de DNA diferente. Examinando o padrão de manchas, os cientistas podem determinar o padrão dos RFLPs presentes em uma amostra.

Os polimorfismos

ocorrem amplamente em todo o genoma humano, e a análise destes provou que diferentes grupos de pessoas tendem a compartilhar RFLPs em comum. Certos tipos de RFLP são comuns a pessoas de diferentes grupos étnicos ou origens geográficas, por exemplo, e a ligação também existe em grupos familiares. Essa variação existe em todo o reino animal, tornando -a uma ferramenta de pesquisa útil não apenas para rastrear ancestralidade humana, mas também para estudar a migração e a evolução da vida selvagem.

A análise

Polimorfismos de comprimento de fragmento de restrição pode fornecer informações úteis para fins clínicos e médicos. As sondas de polimorfismo de comprimento do fragmento de restrição são usadas em testes de paternidade, no diagnóstico de doenças hereditárias, na ciência forense e na genotipagem. AnaPadrões de Lyzing de RFLPs em todo um genoma é a base das impressões digitais de DNA, a técnica que é a base de todos esses diferentes usos.