Vilka är stegen i ELISA -proceduren?

ELISA -proceduren börjar i kliniken, med ett blodprov tas från patienten.Ett antal steg följs sedan med ELISA -testpaketet i laboratoriet.Testet kommer att upptäcka närvaron av antikroppar eller antigener till en sjukdom, såsom HIV, i blodet.Stegen inkluderar tillsats av olika ämnen och tvätt och resultat mäts generellt genom en färgförändring.

Den enzymbundna immunosorbentanalysen (ELISA), som också kallas enzymet immunoassay (EIA), används som ett diagnostiskt test.Det är mest känt som ett diagnostiskt test för HIV.Testplattan består vanligtvis av 96 små brunnar som ett specifikt antigen är immobiliserat.Om antikroppen finns i serumprovet kommer det att binda till antigenet, vilket möjliggör detektion via de olika stegen i ELISA -proceduren.

Det första steget i ELISA -proceduren är att få ett prov från patienten.Detta görs av en sjuksköterska under sterila förhållanden.Blodet tas vanligtvis från en ven i armen eller handen.En turnering placeras på armen för att svälla venen och underlätta proceduren och huden rengörs där nålen kommer att sättas in.En liten prick kan kännas när nålen går in och blodet kommer att samlas in i ett sterilt rör.

När blodprovet har tagits överförs det till laboratoriet där resten av ELISA -proceduren kommer att utföras av ett laboratoriumtekniker.Blodprovet läggs först till ELISA -plattans brunnar.Om den specifika antikroppen är närvarande binder den till antigenet.Plattan tvättas sedan med en buffert för att ta bort obundna antikroppar.

En andra antikropp, normalt av djurens ursprung, som har ett enzym som är fäst vid den, tillsätts sedan, som kommer att binda till antikropp-antigenkomplexet.Plattan tvättas igen för att ta bort överskott.Enzymet är färgreaktivt när ett substrat tillsätts i slutet av ELISA-proceduren.Det är mätningen av graden av färgförändring som ger resultatet.

ELISA -proceduren måste följas noggrant för att undvika falska resultat.I de flesta ELISA -plattor ingår en positiv och negativ kontroll för att minimera sådana falska resultat.Vid testning för HIV kommer ett positivt resultat vanligtvis att följas upp av en andra, bekräftande, test, ofta av en annan typ, till exempel en Western blot.