Vad är en biotinantikropp?

I motsats till vad man först kan tänka, är en biotinantikropp inte ett ämne som höjs mot biotin.Snarare är en biotinantikropp en antikropp som har konjugerats till biotin.Biotin binder starkt till en ligand mdash;Avidin mdash;som i sin tur kan konjugeras till ljusdetekterbara molekyler såsom fluoroforer.Biotin och avidin bildar en av de starkaste biologiskt relevanta kovalenta bindningarna kända, vilket gör biotin- och avidin-konjugerade ligand/receptorenheter särskilt användbara i vetenskapliga studier.

Biotin är ett B-komplex vitamin mdash;Vitamin B7.Det är en så liten molekyl att flera biotinmolekyler kan konjugeras till en enda monoklonal eller polyklonal antikropp.Det faktum att biotin också är vattenlöslig möjliggör större mångsidighet i buffertsystem än om det var olösligt.För större specificitet rekommenderas ofta monoklonal antikroppskonjugering till biotin över polyklonal antikroppskonjugering.Biotinmolekylen kan vara direkt bunden med antikroppen av intresse, eller den kan kopplas genom en molekylär svans för att möjliggöra mer rörelsefrihet.

Biotinliganden Avidin finns i äggalbumin.Det kan göras billigt och lätt isolerat.Flera avidinmolekyler kommer att binda till varje biotinreceptor, vilket förstärker en enda antikroppsdetekteringssignal.När en biotinantikropp följer ett antigen av intresse, kan en experimenter sedan exponera komplexet för avidin konjugerade för fluoroforer, vilket gör komplexet detekterbart.Genom fluorescerande avbildning kan biotinantikroppen och avidinkonjugerad ligand detekteras med ljusmikroskopi, och antigen av intresse kan studeras in situ .Vanlig lösning för antigendetektering finns det alternativ som fortfarande använder Biotin/Avidin -komplexet.Bindande biotin till en ligand som ett neurotoxin kan vara fördelaktigt när det gäller att upptäcka placering av neuronala receptorer som påverkas av neurotoxinet i fråga.Det är också möjligt att konjugera biotin till en nukleotidsekvens såsom messenger -ribonukleinsyra (mRNA) för att hitta var dessa nukloniska sekvenser översätts till proteiner eller för att detektera cellulär mRNA -reglering.

Det är möjligt att köpa biotinylerade polyklonala eller monoklonala antikroppar,även om biotinylerad antikroppsproduktion ligger inom många experimenters förmåga.Protokoll kan hittas online som antyder antikroppsbiotinyleringsmetoder, även om de lättast följde protokoll kopplar direkt biotin till en antikropp snarare än att föreslå hur man interkalerar en molekylavstånd.Molekylära avstånd mellan biotin och dess tillhörande antikropp gör det möjligt för större avstånd att exponera fler molekyler till bindningsställen, och dessa biotinantikroppar köps vanligtvis snarare än tillverkade.