Vad är kvantitativ fluorescens?

Kvantitativ fluorescens är utställningen av strålning som släpps ut i ett prov.Med hjälp av bildteknologi kan en forskare samla in information om exemplet och använda den för att lära sig mer om dess struktur eller funktion.Detta tillvägagångssätt används ofta i biologi för att studera enskilda celler och hela organismer.Det kräver åtkomst till ett labb som innehåller mikroskopiutrustning och kameror med lämplig känslighet.Exempel på bilder från denna form av analys kan ses i läroböcker och vetenskapliga artiklar, tillsammans med diskussioner om de erhållna data.

Prover som är beredda för mikroskopavbildning kan färgas med fluorescerande taggar, som proteiner som fästs vid specifika strukturer i cellen.När dessa taggar ses genom en kamera under rätt förhållanden, tänds de.Att helt enkelt observera belysningen kan ge viktig information för forskaren.Till exempel kan en immunolog som letar efter spår av en specifik antikropp använda en tagg för att identifiera den.Detta är ett exempel på kvalitativ fluorescens, där belysningen ger allmän information om provets egenskaper.

I mätningar av kvantitativ fluorescens samlar forskaren specifik, mätbar information.Detta kan inkludera data om ljusets exakta intensitet.Ytterligare behandling av provet kan erbjuda möjligheter för avancerade avbildningstekniker som fluorescerande återhämtning efter fotoblekning (FRAP), som ger information om rörelsen av strukturer i proverna.Alla dessa kvantitativa fluorescenstekniker kan ge ny inblick i vad en struktur är, hur den fungerar och vad den innehåller.

Precisionsutrustning krävs för denna typ av arbete.Eventuella fluorescerande behandlingar som läggs till ett prov måste vara noggrant beredda så att de taggar de önskade strukturerna och inget annat.Utrustningen måste vara lämpligt känslig och kalibrerad för att bekräfta att den plockar upp korrekt information.Om detektorn i en digitalkamera till exempel, kan den misslyckas med att samla fluorescens i vissa delar av provet, eller kan generera en falsk avläsning.I båda fallen skulle uppgifterna vara felaktiga.

Patologlaboratorier kan använda kvantitativ fluorescens för utvärdering av vissa prover.Denna teknik används också allmänt i forskning.Vissa mycket slående bilder kan utvecklas med hjälp av fluorescerande taggar för att separera strukturer som nerver eller specifika proteiner.Förutom att de är visuellt anmärkningsvärda kan bilderna innehålla en mängd information för forskare med förmågan att läsa dem.Det är möjligt att analysera kvantitativa fluorescensbilder med avancerade datorprogram för att extrahera mer data och generera meningsfulla resultat.