โปรโตคอล ELISA คืออะไร?

am immunosorbent assay (ELISA) การทดสอบทั่วไปของเอนไซม์ที่เชื่อมโยงกันเป็นการทดสอบทั่วไปที่ใช้ในภูมิคุ้มกันวิทยาเพื่อตรวจจับแอนติเจนหรือแอนติบอดีแอนติเจนกระตุ้นปฏิกิริยาของระบบภูมิคุ้มกัน mdash;กล่าวอีกนัยหนึ่งพวกเขาทำให้เกิดความเจ็บป่วยELISA ใช้ในการตรวจจับแอนติเจนของแบคทีเรียและไวรัสจำนวนมากรวมถึงไวรัสภูมิคุ้มกันบกพร่องของมนุษย์ (HIV), มาลาเรีย, อหิวาตกโรค, หัดและโรคคางทูมโปรโตคอล

ELISA ที่แตกต่างกันเล็กน้อยสามารถใช้ในการตรวจจับแอนติบอดีต่อสิ่งเหล่านี้และเชื้อโรคอื่น ๆ อีกมากมายโปรโตคอล ELISA เป็นขั้นตอนขั้นตอนในการดำเนินการ ELISA เฉพาะแม้ว่าโปรโตคอล ELISA จะแตกต่างกันเล็กน้อยขึ้นอยู่กับประเภทของ ELISA ที่ดำเนินการแนวคิดพื้นฐานเหมือนกันสำหรับพวกเขาทั้งหมดELISA ขึ้นอยู่กับแอนติบอดีที่เชื่อมโยงกับเอนไซม์หรือที่เรียกว่า

antiglobulins

โมเลกุลของสัญญาณที่แนบมากับ antiglobulins เหล่านี้ทำให้เกิดสารตั้งต้นที่เพิ่มระหว่างการทดสอบเพื่อเปลี่ยนสีหากมีแอนติเจนหรือแอนติบอดีที่ต้องการปริมาณแอนติเจนหรือแอนติบอดีที่มีอยู่นั้นเป็นสัดส่วนกับปริมาณการเปลี่ยนแปลงสีซึ่งสามารถวัดได้ด้วยเครื่องอ่านแผ่นอิเล็กทรอนิกส์มีสามประเภทหลักของ ELISAA

โดยตรง

elisa มักจะใช้ในการตรวจจับแอนติเจนมากกว่าแอนติบอดีนี่คือโปรโตคอล ELISA ที่ง่ายที่สุดเนื่องจากแอนติบอดีที่เชื่อมโยงกับเอนไซม์ผูกติดกับแอนติเจนที่ต้องการโดยตรงสารตั้งต้นจะถูกเพิ่มเพื่อกำหนดปริมาณของแอนติเจนที่มีอยู่

ทางอ้อม

elisa ถูกใช้เพื่อตรวจจับแอนติบอดีในขณะที่ ELISA ทางอ้อมชนิดอื่น mDASH;เรียกว่าแซนวิช elisa mdash;สามารถใช้ในการตรวจจับแอนติเจนโปรโตคอล ELISA แซนวิชต้องการแอนติบอดีสองตัวเรียกว่าการจับและตรวจจับแอนติบอดีเพื่อผูกกับแอนติเจนที่ต้องการมีการเพิ่มแอนติโกลบูลินซึ่งผูกกับแอนติบอดีตรวจจับและเพิ่มสารตั้งต้นELISA ทางอ้อมเป็นไปตามโปรโตคอลที่คล้ายกัน แต่ใช้แอนติเจนที่จับได้มากกว่าแอนติบอดีที่จับได้เพื่อตรวจจับแอนติบอดีที่ต้องการ

การแข่งขัน

ELISA มักใช้สำหรับการตรวจจับแอนติเจนที่มีอยู่ในความเข้มข้นต่ำการทดสอบที่ละเอียดอ่อนตรงกันข้ามกับโปรโตคอล ELISA อื่น ๆ ELISA ที่มีการแข่งขันใช้แอนติเจนที่เชื่อมโยงกับเอนไซม์แทนที่จะเป็นแอนติบอดีและวิธีการหาปริมาณที่แตกต่างกันเล็กน้อยในนั้นตัวอย่างที่มีแอนติเจนที่จะตรวจพบและแอนติเจนที่เชื่อมโยงกับเอนไซม์จะถูกเพิ่มเข้าไปในแอนติบอดีและแอนติเจนทั้งสองแข่งขันกันเพื่อหาไซต์ที่มีผลผูกพันกับแอนติบอดีเมื่อมีการเพิ่มสารตั้งต้นการเปลี่ยนสีจะมากขึ้นโดยมีอัตราส่วนที่สูงขึ้นของแอนติเจนที่เชื่อมโยงกับเอนไซม์ที่ถูกผูกไว้กับแอนติเจนตัวอย่างที่ถูกผูกไว้ซึ่งหมายความว่าตรวจพบการเปลี่ยนแปลงสีที่สูงขึ้นที่ความเข้มข้นต่ำของแอนติเจนตัวอย่างซึ่งเป็นสิ่งที่ทำให้วิธีนี้มีความอ่อนไหวมาก