เทคนิคการผสมพันธุ์ในแหล่งกำเนิดฟลูออเรสเซนต์คืออะไร?

ฟลูออเรสเซนต์ในการผสมพันธุ์ของแหล่งกำเนิดหรือที่เรียกว่าฟลูออเรสเซนต์ในการผสมพันธุ์ของแหล่งกำเนิดมักเรียกกันทั่วไปว่าปลามันเป็นเทคนิคที่เกี่ยวข้องกับการใช้ DNA สั้น ๆ ที่ติดฉลากด้วยสีย้อมเรืองแสงเพื่อตรวจจับความผิดปกติทางพันธุกรรมปลาช่วยให้ผู้ตรวจสอบสามารถมองเห็นโครโมโซมส่วนของโครโมโซมหรือยีนที่เฉพาะเจาะจงได้อย่างรวดเร็วและแม่นยำสิ่งนี้มักใช้เพื่อตรวจสอบการพยากรณ์โรคและการรักษาโรคบางชนิดโดยเฉพาะมะเร็ง

ปลาใช้เพื่อตรวจสอบว่าโครโมโซมมีความผิดปกติหรือไม่ซึ่งอาจรวมถึงการลบโครโมโซมการจัดเรียงใหม่หรือ translocations ซึ่งโครโมโซมสองตัวได้เปลี่ยนเซ็กเมนต์ปลายังช่วยให้ผู้ตรวจสอบเห็นภาพยีนที่เฉพาะเจาะจงมันสามารถตรวจสอบว่ามียีนบางตัวอยู่หรือไม่ที่อยู่บนโครโมโซมและมีหลายสำเนาอยู่สิ่งนี้เรียกว่าการทำแผนที่ยีน

การแต่งหน้าทางพันธุกรรมของบุคคลนั้นมีอยู่ใน DNA ของพวกเขาซึ่งตั้งอยู่ในนิวเคลียสของเซลล์ทั้งหมดของพวกเขาDNA มีสองเส้นที่ฟรีซึ่งกันและกันกล่าวอีกนัยหนึ่งพวกเขามีโมเลกุลที่เรียกว่าคู่ฐานที่ตรงกับกันอย่างแน่นอนยีนเป็นเซ็กเมนต์ของ DNA ที่มีลำดับคู่ฐานเฉพาะและตั้งอยู่ในพื้นที่เฉพาะของโครโมโซมยีนได้รับการสืบทอดและกำหนดวิธีการทำงานของเซลล์ แต่พวกเขายังสามารถกลายพันธุ์ได้หากลำดับของคู่ฐานดีเอ็นเอเปลี่ยนแปลง

เทคนิคการผสมพันธุ์ในแหล่งกำเนิดในแหล่งกำเนิดใช้ประโยชน์จากธรรมชาติของเส้นดีเอ็นเอฟรีนักวิจัยแรกสร้างโพรบนี่คือ DNA สั้น ๆ สั้น ๆ ที่ฟรีต่อลำดับทางพันธุกรรมที่ผู้ตรวจสอบกำลังมองหาโพรบนั้นจะถูกติดป้ายหรือติดกับสีย้อมฟลูออเรสเซนต์

เซลล์จากเนื้อเยื่อที่เป็นโรคเช่นการตรวจชิ้นเนื้อเนื้องอกมักจะทำตัวอย่างที่จะตรวจสอบโดยปลาตัวอย่างถูกทำให้ร้อนเพื่อลด DNA ในนิวเคลียสของเซลล์ซึ่งหมายความว่า DNA สองเส้นในเซลล์ตัวอย่างจะแยกออกจากกันเพื่อสร้างเส้นเดี่ยวโพรบปลาที่เฉพาะเจาะจงจะถูกผสมกับตัวอย่างกล่าวอีกนัยหนึ่งสายเดี่ยวของโพรบจะถูกนำมาใช้และฟิวส์ด้วยเส้นเดี่ยวฟรีในเซลล์ตัวอย่างที่ถูกทำลาย

ใช้กล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนต์พิเศษนักวิจัยจะดูตัวอย่างหากยีนหรือโครโมโซมเฉพาะมีอยู่ในเซลล์ตัวอย่างมันจะปรากฏเป็นแสงฟลูออเรสเซนต์กับพื้นหลังที่มืดกว่านักวิจัยสามารถดูได้อย่างง่ายดายว่ายีนนั้นมีอยู่หรือไม่และถ้าเป็นเช่นนั้นมีจำนวนสำเนาของยีนในแต่ละเซลล์หากนักวิจัยกำลังมองหาที่ตั้งของยีนเขาหรือเธอจะเห็นว่ามันอยู่ที่ไหนในโครโมโซมกล้องจุลทรรศน์แสงปกติไม่สามารถใช้กับปลาได้เนื่องจากสีย้อมฟลูออเรสเซนต์ให้แสงในระดับต่ำมาก

การใช้ DNA hybridization กับโพรบสำเร็จเป็นครั้งแรกในปี 1960;อย่างไรก็ตามโพรบถูกระบุด้วยสารกัมมันตรังสีมากกว่าสารเรืองแสงสิ่งนี้มีปัญหาหลายอย่างสารกัมมันตรังสีนั้นไม่เสถียรเป็นอันตรายและต้องการโปรโตคอลพิเศษสำหรับการกำจัดนอกจากนี้ยังใช้เวลานานในการวัดสัญญาณกัมมันตรังสีที่ปล่อยออกมาโดยโพรบไฮบริดเทคนิคการผสมพันธุ์ในแหล่งกำเนิดฟลูออเรสเซนต์เอาชนะอุปสรรคเหล่านี้ส่วนใหญ่

หากผู้ตรวจสอบรู้ว่าพวกเขากำลังมองหายีนอะไรปลานั้นรวดเร็วและแม่นยำในการค้นหาปลายังสามารถดำเนินการได้แม้ว่าเซลล์จะไม่แบ่งแยกอย่างแข็งขันและให้ข้อมูลที่เฉพาะเจาะจงมากขึ้นเกี่ยวกับความผิดปกติในโครโมโซมเทคนิคทั่วไปเพิ่มเติมเช่น karotyping เพียงบอกผู้ตรวจสอบจำนวนและขนาดของโครโมโซมภายในเซลล์

ฟลูออเรสเซนต์ในการผสมพันธุ์ของแหล่งกำเนิดมีข้อเสียเนื่องจากกุญแจสู่ปลาคือการรู้ลำดับคู่ฐานและ/หรือตำแหน่งของยีนจึงไม่สามารถใช้เป็นเครื่องมือคัดกรองทั่วไปได้นอกจากนี้ยังมีราคาแพงกว่าเทคนิคอื่น ๆ ที่เฉพาะเจาะจงน้อยกว่าและอาจไม่สามารถใช้ได้ในห้องปฏิบัติการหรือโรงพยาบาลทั้งหมด/p

ข้อดีและข้อเสียของฟลูออเรสเซนต์ในการผสมพันธุ์ของแหล่งกำเนิดนั้นอธิบายได้ดีที่สุดโดยตัวอย่างปลาถูกนำมาใช้เป็นประจำในการวินิจฉัยมะเร็งเต้านมเพื่อตรวจสอบว่าผู้ป่วยมียีนหลายชุดที่เรียกว่า HER2 หรือไม่สิ่งนี้มักจะบ่งบอกถึงรูปแบบของมะเร็งเต้านมที่ก้าวร้าวมากขึ้นและผู้ป่วยควรได้รับยาบางชนิดเป็นส่วนหนึ่งของการรักษาปลาสามารถใช้สำหรับสิ่งนี้ได้เนื่องจากลำดับคู่ฐานและตำแหน่งโครโมโซมของยีน HER2 เป็นที่รู้จักในทางตรงกันข้ามปลาไม่สามารถใช้เพื่อกำหนดยีนหรือยีนที่ไม่รู้จักทำให้เกิดมะเร็งเต้านมหรือคัดกรองมะเร็งเต้านมโดยทั่วไป