พลาสมิดคืออะไร?

ภายในแบคทีเรียที่แตกต่างกันหลายชิ้นส่วนวงกลมขนาดเล็กของ DNA สามารถพบได้ในไซโตพลาสซึมวงกลม DNA เหล่านี้เรียกว่าพลาสมิดและแยกออกจาก DNA โครโมโซมหรือ DNA ที่มียีนสำหรับเซลล์แบคทีเรียพลาสมิดหลายสำเนามักจะมีอยู่ในครั้งเดียวในเซลล์แบคทีเรียพลาสมิดมีบทบาทสำคัญมากในด้านพันธุวิศวกรรมโดยเฉพาะอย่างยิ่งในการโคลนยีน

เมื่อยีนถูกโคลนกระบวนการมักจะเกิดขึ้นภายในแบคทีเรียเพื่อให้ได้ยีนที่จะถูกโคลนเข้าไปในแบคทีเรียจำเป็นต้องใช้เวกเตอร์พลาสมิดคือสิ่งที่ใช้เป็นเวกเตอร์เนื่องจากสามารถผ่านได้อย่างง่ายดายจากเซลล์หนึ่งไปยังอีกเซลล์หนึ่ง

มีหลายขั้นตอนที่เกี่ยวข้องกับการโคลนยีนก่อนที่จะแทรกพลาสมิดลงในเซลล์โฮสต์ขั้นแรกต้องแยกยีนที่ต้องคัดลอกไปเช่นเดียวกับพลาสมิดที่จะใช้เป็นเวกเตอร์เมื่อทำสิ่งนี้เสร็จแล้วยีนจะต้องแทรกลงในพลาสมิดดีเอ็นเอพลาสมิดจะถูกแทรกเข้าไปในเซลล์โฮสต์แบคทีเรียสำหรับการจำลองแบบ

เพื่อแยกพลาสมิดออกจากเซลล์แบคทีเรียเซลล์จะต้องได้รับการรักษาด้วยเอนไซม์ในขั้นต้นเพื่อสลายผนังเซลล์ของแบคทีเรียดีเอ็นเอโครโมโซมขนาดใหญ่คือแยกออกจากพลาสมิดขนาดเล็กโดยใช้เครื่องหมุนเหวี่ยงพลาสมิดดีเอ็นเอที่แยกได้พร้อมที่จะใส่ยีนลงไปในนั้น

พลาสมิดถูกสร้างขึ้นจากวงกลมสองเส้นของ DNAในการแทรกยีนที่ต้องการ DNA พลาสมิดจะถูกตัดด้วยเอนไซม์ จำกัดเอนไซม์เหล่านี้จะตัด DNA ที่ลำดับนิวคลีโอไทด์ที่เฉพาะเจาะจงมากเท่านั้นเมื่อ DNA พลาสมิดถูกตัดลำดับของ linker จะถูกเพิ่มเข้าไปในปลายหลวมที่สัมพันธ์กับปลายของยีนที่จะแทรกสิ่งนี้ทำให้มั่นใจได้ว่ายีนนั้นเข้ากับพลาสมิดได้อย่างแม่นยำ

เมื่อยีนถูกแทรกเข้าไปในพลาสมิดตอนนี้ก็พร้อมที่จะแทรกเข้าไปในแบคทีเรียที่มีชีวิตแบคทีเรียทำซ้ำพลาสมิดของพวกเขาเพื่อให้เซลล์เดียวสามารถมีสำเนาจำนวนมากสามารถมีพลาสมิดเดียวได้ถึง 200 สำเนาภายในแบคทีเรียหนึ่งแบคทีเรียหากพลาสมิดถูกนำเข้าสู่เซลล์แบคทีเรียจำนวนมากสำเนาของยีนจำนวนมากสามารถผลิตได้อย่างรวดเร็วโดยเฉพาะอย่างยิ่งเมื่อเซลล์แบคทีเรียทำซ้ำทุก ๆ 20 นาที

นี่คือกระบวนการที่ใช้ในการสร้างอินซูลินของมนุษย์การเข้ารหัสยีนสำหรับอินซูลินถูกแยกและแทรกลงในพลาสมิดพลาสมิดทั้งหมดที่มียีนอินซูลินจะถูกนำเข้าสู่แบคทีเรียซึ่งพวกมันทำซ้ำจากนั้นแบคทีเรียยังคงทำซ้ำตัวเองอย่างต่อเนื่องเพื่อให้เซลล์หลายล้านเซลล์ที่มียีนอินซูลินสามารถสร้างได้ในเวลาอันสั้นยีนที่โคลนนี้เป็นแหล่งที่เชื่อถือได้สำหรับอินซูลินของมนุษย์