2D เจลอิเล็กโทรโฟเรซิสคืออะไร?

เจลอิเล็กโทรโฟเรซิสสองมิติ (2D) เป็นวิธีการที่นักวิทยาศาสตร์ใช้แยกออกจากกันและวิเคราะห์การผสมโปรตีนโดยการแยกโปรตีนเป็นครั้งแรกตามแกนสองแกนที่แตกต่างกันมันเป็นเทคนิคที่ใช้บ่อยที่สุดเมื่อจัดการกับส่วนผสมที่ซับซ้อนหรือหนาของโปรตีนซึ่งมักจะมีขนาดโปรตีนที่ทับซ้อนกันเจลอิเล็กโทรโฟเรซิส 2D แตกต่างจากอิเล็กโทรโฟเรซิสหนึ่งมิติเนื่องจากวิธีการเดิมใช้การแยกโปรตีนตามลักษณะโปรตีนสองชนิดที่แตกต่างกันใช้ในการวิจัยเพื่อแยกโมเลกุลโดยใช้ประโยชน์จากความจริงที่ว่าโมเลกุลชีวภาพจำนวนมากเช่น DNA มีประจุไฟฟ้าความจริงข้อนี้สามารถใช้เพื่อประโยชน์ของนักวิทยาศาสตร์ได้เนื่องจากโมเลกุลที่มีประจุสามารถแยกออกจากขนาดผ่านสารตั้งต้นที่มีรูพรุนเช่น agarose โดยใช้การไล่ระดับแรงดันไฟฟ้าข้ามเจลที่มีรูพรุนและไอออนิกเมื่อเวลาผ่านไปโมเลกุลจะผ่านเจลนี้ไปยังประจุที่ตรงข้ามกับประจุธรรมชาติของโมเลกุลโมเลกุลขนาดเล็กและโมเลกุลที่มีประจุอย่างหนักทั้งคู่เคลื่อนที่เร็วกว่าโมเลกุลขนาดใหญ่หรือโปรตีนที่มีประจุอ่อนใน electrophoresis เจล 2D หลังจากแยกโปรตีนออกผ่านลักษณะเดียวซึ่งสร้างการไล่ระดับสีแล้วเจลสามารถหันไปด้านข้างเพื่อแยกแถบผลลัพธ์ก่อนหน้านี้ขึ้นอยู่กับลักษณะที่สอง

2D เจลอิเล็กโทรโฟเรซิสมักจะใช้ประจุโมเลกุลลักษณะที่มวลรวมโปรตีนสามารถแยกออกเป็นโปรตีนส่วนประกอบเดี่ยวมวลโปรตีนเป็นอีกคุณสมบัติทั่วไปที่ใช้ในการแยกโปรตีนในอิเล็กโทรโฟเรซิสเจล 2Dหลังจากโปรตีนทำงานบนเจลผ่านเลนเดียวในอิเล็กโทรโฟเรซิสเจลหนึ่งมิตินั้นเจลนั้นสามารถหมุนตัวในเครื่องหมุนเหวี่ยงดึงโปรตีนที่หนักกว่าเร็วกว่าโปรตีนขนาดเล็กทิศทางของการดึงนั้นตั้งฉากกับทิศทางที่โปรตีนถูกดึงผ่านเจลเนื่องจากการดึงดูดประจุไฟฟ้าผ่านการไล่ระดับสีแรงดันไฟฟ้า

อิเล็กโทรโฟเรซิสมีการใช้งานมากมายในการศึกษาระดับโมเลกุลรวมถึงการแยกโปรตีนตามลักษณะการสังเคราะห์เช่นโปรตีนเช่นโปรตีนการติดแท็กการแยกโปรตีนขึ้นอยู่กับมวลที่มีลักษณะเฉพาะยังใช้เมื่อโปรตีนถูกแท็กด้วยโมเลกุลอื่น ๆเทคนิคนี้สามารถใช้กับคอมเพล็กซ์โปรตีนเหล่านี้ได้เนื่องจากโปรตีนที่ติดแท็กจะลดลงอย่างง่ายดายผ่านเจลมากกว่าโปรตีนที่ไม่ได้ติดแท็ก

ในขณะที่เจลแยกจำนวนมากในห้องปฏิบัติการทำจาก agarose การแยกโปรตีนโดยเจลอิเล็กโทรโฟเรซิส 2Dเจลประเภทนี้ใช้ในการตรวจสอบแบบตะวันตกและการทดสอบขนาดโปรตีนอื่น ๆAgarose มักใช้สำหรับการแยกส่วน DNA