Skip to main content

การทดสอบการเคลื่อนย้ายแบบอิเล็กโทรฟอเรติกคืออะไร?

assay assay เป็นการทดสอบที่ออกแบบมาเพื่อแยกชิ้นส่วนต้นฉบับของเซลล์ออกเป็นส่วนที่ง่ายต่อการระบุElectrophoretic Mobility Shift Assay เป็นการทดลองที่ใช้ไฟฟ้าเพื่อเคลื่อนย้าย macromolecules เช่นโปรตีนผ่านเมทริกซ์เจลเพื่อทำให้เกิดการแยกระหว่าง macromolecules ที่แตกต่างกันตามขนาดเช่นเดียวกับแบตเตอรี่รถยนต์ปลายเชิงลบและบวกอยู่ด้านตรงข้ามของการทดสอบการเคลื่อนที่แบบอิเลคโตรฟอเรติกหรือการทดสอบการเปลี่ยนเจลสิ่งนี้ทำให้กระแสไฟฟ้าดึงดูด macromolecules ตามประจุแต่ละโมเลกุล macromolecule จะเคลื่อนที่ในอัตราที่แตกต่างกันเนื่องจากมีขนาดเล็กลงมีการรบกวนจากเจลน้อยลง

จำเป็นต้องมีหลายขั้นตอนในการตั้งค่าการทดสอบการเคลื่อนที่แบบอิเล็กโทรโฟเรติกโมเลกุลขนาดใหญ่ที่ต้องแยกออกจะต้องเตรียมไว้ก่อนmacromolecules ส่วนใหญ่ได้มาจากเซลล์ที่มีชีวิตและต้องการขั้นตอนเฉพาะการได้รับชิ้นส่วนที่จะแยกออกจากกันมักจะต้องมีการหมุนเหวี่ยงและปฏิกิริยาทางเคมีที่ทำลายเซลล์เครื่องหมุนเหวี่ยงจะหมุนขวดด้วยความเร็วสูงและสร้างเม็ดของโมเลกุลขนาดใหญ่ที่จำเป็นสิ่งนี้ละลายและมักจะมีการเพิ่มสีหรือฉลากอื่น ๆ เพื่อช่วยติดตามการทดสอบการเปลี่ยนแปลงของเจล

เจลบางครั้งเรียกว่าเตียงจะต้องทำสดใหม่จากส่วนผสมที่แม่นยำของ agarose ผงและน้ำที่เปลี่ยนจากของเหลวเป็นเจลอย่างรวดเร็วโดยทั่วไปการทดสอบการเคลื่อนที่แบบอิเล็กโทรฟอเรติกจะมีหลายเลนสำหรับการทดสอบแยกต่างหากซึ่งใช้เพื่อเปรียบเทียบส่วนผสมของโมเลกุล macromolecule ที่แตกต่างกันเลนหนึ่งถูกตั้งค่าเป็นตัวควบคุมเสมอและมักจะมี macromolecule เพียงชนิดเดียว

แหล่งพลังงานควรได้รับการคัดเลือกอย่างระมัดระวังและไม่ได้เชื่อมต่อจนกว่าทุกอย่างจะพร้อมระยะเวลาที่พลังงานอยู่ที่กำหนดการเปลี่ยนแปลงการเคลื่อนที่ของโมเลกุลขนาดใหญ่มันเป็นสิ่งสำคัญที่จะแยกชิ้นส่วนให้เพียงพอสำหรับการวิเคราะห์ที่เหมาะสมหากพลังงานไม่ได้กำหนดเวลาอย่างเหมาะสมการเปรียบเทียบในอนาคตจะไม่ถูกต้องเช่นกันทิศทางของ macromolecules จะถูกกำหนดโดยสิ่งที่พวกเขามีค่าใช้จ่ายตามธรรมชาติ mdash;ส่วนใหญ่ย้ายไปยังจุดสิ้นสุดเชิงลบ

การทดสอบทางพันธุกรรมอย่างง่ายและการวิเคราะห์โปรตีนมักจะทำด้วยการทดสอบการเคลื่อนที่แบบอิเล็กโทรฟอเรติกสิ่งนี้จะแสดงโดยการเปลี่ยนแปลงที่แตกต่างกันในเลนต่าง ๆหากมีปฏิสัมพันธ์เกิดขึ้น macromolecules จะรวมและทำงานช้าลงผ่านเมทริกซ์เมื่อเทียบกับเลนควบคุมที่มี macromolecule เพียงหนึ่งเดียวการทดสอบการเปลี่ยนแปลงของเจลใช้เพื่อกำจัดหรือยืนยันผลลัพธ์ทางพันธุกรรมอย่างรวดเร็วซึ่งวิธีการที่ซับซ้อนอาจใช้เวลานานกว่าจะเสร็จสมบูรณ์พวกเขายังสามารถตรวจสอบได้ว่าแอนติบอดีระบบภูมิคุ้มกัน macromolecule ติดกับโปรตีนซึ่งสามารถใช้ในการต่อสู้กับแบคทีเรียและไวรัส